title

جداسازی سلولهای بنیادی عصبی از مغز موش بالغ و بررسی تکثیر و تمایز آنها بر روی نانو داربست های پلیمری

اسدی, اسداله ، گل محمدی, محمد قاسم ، سقا, محسن ، میری, وحیده (1392) جداسازی سلولهای بنیادی عصبی از مغز موش بالغ و بررسی تکثیر و تمایز آنها بر روی نانو داربست های پلیمری. کارشناسی ارشد (پایان نامه) دانشگاه محقق اردبیلی.


[img]
پیش نمایش
متنی - گزارش نهایی طرح تحقیقاتی/ پایان نامه
171kB

خلاصه فارسی

مهندسی بافت عصب یکی از امیدوارکننده ترین روش ها برای برای درمان ضایعات دژنراتیو سیستم عصبی مرکزی می باشد. توزیع سه بعدی و رشد سلول ها درون داربست متخلخل از اهمیت بالینی برای مهندسی بافت عصب برخودار می باشد. لذا این مطالعه به منظور بررسی تکثیر، تعامل و تمایزسلولهای بنیادی و پیش ساز عصبی بر روی نانوداربست پلیمری طراحی گردید. بدین منظور نانوداربست پلیمری PLLA با روش الکتروریسی تهیه شد. داربست تهیه شده، وسلول های بنیادی و پیش ساز عصبی جدا شده از ناحیه تحت بطنی مغز موش بالغ برروی این داربست کشت داده شدند. نانوداربست پلیمری PLLA از لحاظ مناسب بودن خصوصیات سطحی، درصد تخلخل، اندازه ی منافذ، نحوه ی توزیع منافذ، رفتارتخریب پذیری , از طریق آنالیز نتایج SEM و طیف سنجی برای تایید پایداری آن ها جهت اهداف مهندسی بافت عصب مورد بررسی قرار گرفت. علاوه بر این مطالعه ی میکروسکوپ الکترونی نگاره نشان دهنده ی خصوصیات سطحی مناسب داربست بود. تخلخل سنجی بر اساس قانون ارشمیدس بیانگر تخلخل بالای 90 درصد در داربست بود. بررسی زیست سازگاری داربست با استفاده از آزمون MTT نشان داد که که نانو داربست PLLA سطوح بهتری را برای رشد و تکثیرو تمایز سلول های بنیادی عصبی فراهم می آورد. سلول های بنیادی عصبی به لحاظ مورفولوژیک و نحوه ی اتصال بر روی داربست بوسیله میکروسکوپ الکترونی مورد بررسی قرار گرفت. همچنین برای مشاهده ی روند چسبندگی و تکثیر سلول های بنیادی عصبی بر روی نانو داربست، هسته آن ها به وسیله ی DAPI (4،6-دی آمینو-2-فنیلی ندول دی هیدروکلرید ) رنگ آمیزی شد. همچنین به منظور بررسی توان تمایزی این سلول ها در سطح داربست، به مدت 21 روز از محیط تمایزی استفاده شد و روند تمایز طی روزهای 21،14،5 توسط رنگ آمیزی ایمنوفلورسانس و با نشانگرهای MAP2 و GFAP مورد بررسی قرار گرفت. علاوه بر این جهت بررسی مورفولوژی سلول های تمایزیافته بر روی نانوداربست، تصاویر میکروسکوپ الکترونی تهیه گردید. در مجموع نتایج به دست آمده بیانگر این است که که نانوداربست پلیمری PLLA می تواند به دلیل زیست سازگاری و خواص مکانیکی مناسب، بستر مناسبی جهت تکثیر، تمایز و رشد طبیعی سلول های بنیادی و پیش ساز عصبی فراهم می کند.

عنوان انگليسي

Isolation of neural stem cells from adult mouse brain and evalution of the proliferation and differentiation on polymeric nano-scaffold

خلاصه انگلیسی

Nerve tissue engineering (NTE) is one of the most promising methods to treat the CNS neurodegenerative diseases. Three-dimensional distribution and growth of cells within the porous scaffold are of clinical significance for NTE. This study was designed to investigate the proliferation, interaction and differentiation of the adult neural stem and progenitor cells (NSPCs) on the polymeric nono-scaffold.In this regard, the PLLA nano scaffolds were fabricated Electrospining technique. NSPCs were isolated from the subventricularzone of the adult mouse brain and cultured on the scaffold. The obtained scaffolds were investigated for their different physicochemical parameters including surface properties, porosity percent, pore size, distribution of pores, degradability, via analysis of SEM and spectroscopic results, for confirming their suitability for NTE aims. Porosity measurement, based on Archimedes principle, was representing over 90% porosity in the scaffold. The biocompatibility of the scaffoldsstudied by MTT test showed that the nano-scaffold provides an appropriate surface for growth, proliferation and differentiation of the NSPCs. The terms of morphological characteristics and cell adhesion on the scaffold, was studied by SEM images. To observe the adhesion and growth of the NSPCson thenanofibrous scaffolds, nuclear staining with 4,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI).Also, to investigate the differentiation potential of NSPCs in the scaffold, the cells were treated with neurogenic differentiation medium up to 21 daysvia examiningMAP2 and GFAP marker using immunohistochemicalstaining5, 14 and 21 days. Furthermor morphology of the differentiated cells on the scaffold was examined using SEM. Taken together, these results suggested that the PLLA nano-Scaffold due to the biocompatible properties is an appropriate structure for proliferation, differentiationand normal growth of the NSPCs.

نوع سند :پایان نامه (کارشناسی ارشد )
زبان سند : فارسی
استاد راهنما :اسداله اسدی
استاد راهنما :محمد قاسم گل محمدی
استاد مشاور :محسن سقا
دانشجو :وحیده میری
کلید واژه ها:مهندسی بافت عصب، نانوداربست پلیمری، سلول های بنیادی عصبی، میکروسکوپ الکترونی نگاره، رنگ آمیزی ایمنوفلورسانس
کلید واژه ها (انگلیسی):Nerve Tissue Engeering , polymeric Nano-Scaffold, Neural Stem Cells, Scanning Electrone Microscope , Immunoflourescence Staining
موضوعات :QS آناتومی انسان
WL سیستم عصبی
بخش های دانشگاهی :دانشكده پزشكي > گروه علوم پایه > بخش علوم تشريح
کد شناسایی :6462
ارائه شده توسط : دکتر محسن سقا
ارائه شده در تاریخ :16 اسفند 1393 07:11
آخرین تغییر :16 اسفند 1393 07:11

فقط پرسنل کتابخانه صفحه کنترل اسناد

Document Downloads

More statistics for this item...