تأثیر 3p-124-miR بر تمايز نوروني سلول های بنیادی جدا شده از ناحیه بالج فولیکول مو

Persian Abstract

مقدمه : سلول های بنیادی فولیکول مو بعنوان نمونه ای از سلول های بنیادی بالغ با پتانسیل تکثیری و تکوینی گسترده با قابلیت تمایز به سلول های نورونی و گلیالی هستند. میکروآرناها تنظیم کننده های بسیار مهم حفظ و تغییر وضعیت سلولی در طول تکثیر یا تمایز سلول های بنیادی هستند. میکروآرناهای مختلف، تکثیر و تمایز سلول های بنیادی فولیکول مو را تنظیم می کنند. در میان میکروآرناهای عصبی، عملکرد 124-miR در تمایز نورونی تا حدود زیادی مورد مطالعه قرارگرفته است؛ با این حال، نقش دقیق آن در تمایز عصبی سلول های بنیادی فولیکول مو مشخص نشده است. مواد و روش ها: سلول های بنیادی فولیکول مو از فولیکول های موی سبیل موش جداسازی شدند. سطوح بیان 124-miR ، Map2 ، DLK1 ، )CoREST ( RCOR2 ، )Tlx( NR2E1 ، CCND1 (cyclinD1) های ژن و let-7b ، miR-9 ، miR- ترانسفکشن تأثیر. شد تعیین) RT-PCR) Real-time PCR روش توسط Ptbp1 و Sox9 ، ) NeuN( Rbfox3 124 توسط تکنیک ایمونوسیتوشیمی مورد ارزیابی قرار گرفت . نتايج: ما در این مطالعه نشان دادیم سطح بیان 124-miR و 7b-let متعاقب القای تمایز نورونی بطور قابل ملاحظه ای افزایش یافت. ژن های DLK1 ، Map2 ، Rbfox3 ، CCND1 ، NR2E1 ، RCOR2، Sox9 و Ptbp1 را بعنوان اهداف 124-miR در روند تمایز نورونی سلول های بنیادی فولیکول مو تعیین کردیم. در طول تمایز عصبی و ترانسفکشن سلول ها با mimic 124-miR ،سطوح بیان ژن های CCND1 ، NR2E1 ، RCOR2 ، Sox9 و Ptbp1 کاهش و در مقابل سطح بیان ژن های DLK1 ، MAP2 و Rbfox3 را در HFSC ها افزایش داد. بعلاوه ، بیان بسیار باالی 124-miR ، بیان پروتئین .داد افزایش را) 48.34±11.15) NeuN و( 11.26±58.43) MAP2 های نتیجه گیری : نتایج نشان داد که 124-miR می تواند منجر به پیشرفت تمایز سلول های بنیادی فولیکول مو بسمت سلول های عصبی با هدف گیریِ ژن های غیرعصبی CCND1 ، NR2E1 ، RCOR2 ، Sox9 و Ptbp1 گردد

Title

Effect of miR-124-3p on neuronal differentiation of stem cells isolated from bulge region of hair follicle

English Abstract

Introduction:Hair follicle stem cells (HFSCs) are adult stem cells with high proliferative and developmental capacity in vitro that can be differentiated into neurons and glial cells. microRNAs (miRNAs) are critical regulators of maintaining and changing cellular state during stem cell proliferation or differentiation. Distinct miRNAs regulate the proliferation and differentiation of HFSCs. Among the neural miRNAs, the function of miR-124 in the neural differentiation has been studied extensively. However, its exact role in the neuronal differentiation of HFSCs has not been elucidated. Material and Methods:HFSCs were isolated from mouse whisker follicles. miR-9, let-7b, and miR-124, Ptbp1, Sox9 , CCND1 (cyclinD1), NR2E1 (Tlx), RCOR2 ( CoREST), DLK1, Map2 and Rbfox3 (NeuN ) expression levels were detected by Real Time PCR (RT-PCR). The influence of miR-124 transfection was evaluated using immunostaining. Results:We demonstrated that miR-124 and let-7b expression levels were significantly increased after neural differentiation. DLK1,Map2 , Rbfox3 , CCND1 ، NR2E1 , RCOR2 ,Ptbp1 and Sox9 were identified as targets of miR-124 in neuronal differentiation of the HFSCs.During neural differentiation and miR-124 mimicking, Ptbp1 , Sox9 , CCND1 ، NR2E1 , RCOR2 levels were decreased and increased the level of expression of DLK1, Map2 and Rbfox3 genes in HFSCs. Moreover, miR-124 overexpression increased MAP2 (58.43±11.26) and NeuN (48.34±11.15) proteins expression. Conclusion:The results demonstrated that miR-124 may promote differentiation of HFSCs into neuronal cells by targeting non-neural genes Sox9 , Ptbp1,CCND1 ، NR2E1 and RCOR2. Key words: Hair follicle stem cells, Neural differentiation, miR-124, Sox9, Ptbp1, CCND1 ، NR2E1 , RCOR2,DLK1,Map2,Rbfox3

Document Downloads