title

تشخیص آنتی ژن سطحی هپاتیت B با استفاده از زیست حسگر الکتروشیمیایی

جوهری اهر, محمد ، دشتی, پروین (1399) تشخیص آنتی ژن سطحی هپاتیت B با استفاده از زیست حسگر الکتروشیمیایی. دکتری حرفه ای (پایان نامه) دانشگاه علوم پزشکی اردبیل.

متن کامل





[img]
پیش نمایش
متنی - گزارش نهایی طرح تحقیقاتی/ پایان نامه
2MB
[img]
پیش نمایش
متنی - گزارش نهایی طرح تحقیقاتی/ پایان نامه
1MB
[img] متنی - گزارش نهایی طرح تحقیقاتی/ پایان نامه
محدود به فقط پرسنل سامانه

3MB
[img] متنی - گزارش نهایی طرح تحقیقاتی/ پایان نامه
محدود به فقط پرسنل سامانه

7MB

آدرس اینترنتی رسمی : http://lib.arums.ac.ir

خلاصه فارسی

مقدمه: تشخیص عفونت های ویروسی از جمله هپاتیت و ایدز از اولویت های اصلی سیستم سلامت کشورها می باشد. عفونت های مزمن با ویروس هپاتیت B (ب) ممکن است به کارسینوم کبدی و سیروز منجر شود. آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت ب (HBsAg) بخشی ازاین ویروس است که در موارد عفونت فعال در جریان خون ظاهر می شود و به عنوان یک نشانگر برای تشخیص عفونت حاد و مزمن هپاتیت ب بکار می رود. در سال های اخیر از زیست حسگرها به عنوان یکی از ابزارهای قدرتمند در تشخیص مقادیر خیلی پایین آنتی¬ژن سطحی ویروس هپاتیت ب استفاده شده است. روش کار: در این مطالعه، ابتدا، سطح الکترود صفحه چاپی(SPE) با نانولوله های کربنی چند دیواره (MWCNT) اصلاح گردید. سپس، آنتی بادی (Ab) اختصاصی ضد آنتی ژن سطحی هپاتیت ب بر روی سطح الکترود اصلاح شده MWCNT-SPE متصل شد و در ادامه آلبومین سرم گاوی (BSA) برای پوشش سطوح واکنش نداده استفاده شد تا از اتصالات غیر اختصاصی جلوگیری شود. سپس آنتی ژن سطحی هپاتیت ب که با ترکیب فروسن (*) کنژوگه و نشاندار شده بود (HBsAg*) در تماس با الکترود اصلاح شده Ab/BSA-MWCNT-SPE قرار گرفت و با انکوباسیون، تمام سایت های آنتی بادی های سطح الکترود با HBsAg* به عنوان سیگنال دهنده اشغال گردید. در نهایت الکترود تهیه شده با آنتی ژن غیر نشاندار انکوبه شد و سیگنال های روشن-خاموش آن اندازه گیری شد. نتایج: در این مطالعه، زیست حسگر HBsAg*-Ab/BSA-MWCNT-SPE، با توجه به حضور فروسن در ساختار آنتی بادی ثانویه، با اعمال پتانسیل مناسب، سیگنال الکتروشیمیایی قابل تشخیص را ایجاد کرد. در حضور نمونه واقعی و آنتی ژن غیر کنژوگه (HBsAg)، سیگنال های الکتروشیمیایی با کاهش مواجه شد که به دلیل جایگزین شدن آنتی¬ژن طبیعی با آنتی ژن نشاندار شده با فروسن بود. در شرایط بهینه، حد تشخیص و محدوده خطی به ترتیب برای زیست حسگر معرفی شده 6/3 پیکوگرم بر میلی لیتر و 0/01 تا 300 نانوگرم بر میلی لیتر بدست آمد. نتیجه گیری: زیست حسگر طراحی شده در این مطالعه علارغم دارا بودن حد تشخیص پایین و محدوده خطی وسیع، از دقت، انتخاب پذیری، و حساسیت قابل قبولی برخوردار بود. از مزایای قابل توجه این زیست حسگر می توان به سادگی ساخت آن و پایداری سیگنال های الکتروشیمیایی حاصل اشاره کرد. ساختار این زیست حسگر به گونه ای است که می تواند به عنوان مدلی برای ساخت سایر زیست حسگرها بر پایه سنسورهای صفحه چاپی بکار رود.

عنوان انگليسی

Detection of Hepatitis B surface antigen with electrochemical biosensor

خلاصه انگلیسی

Introduction: Diagnosis of viral infections such as hepatitis and AIDS is a main priority for health systems of countries. Chronic infections with hepatitis B virus can lead to the liver carcinoma and cirrhosis. Hepatitis B surface antigen (HBsAg) is a part of hepatitis B virus that appears in the bloodstream in the case of an active infections and is used as a biomarker for dection of acute and chronic hepatitis B infections. In recent years, biosensors have been used as powerful tools for detection of tiny concentrations of HBsAg. Methods: In this study, first, the surface of the screen-printed electrode (SPE) was modified with multi-walled carbon nanotubes (MWCNT). Second, the specific antibody (Ab) of HBsAg was attached on the MWCNT-SPE (Ab-MWCNT-SPE). In the following, bovine serum albumin (BSA) was used to neutralize unreacted surfaces to prevent non-specific binding sites (Ab/BSA-MWCNT-SPE). Then, all surface of Ab/BSA-MWCNT-SPE covered with ferrocene-modified HBsAg (HBsAg*) as the signaling probe, and incubated with native HBsAg molecules to mesure the on-off signals. Results: The purposed biosensor (HBsAg*-Ab/BSA-MWCNT-SPE) produced detetable ectrochemical signals due to the presence of Ferocene molecules in the structure of antibody molecules. In the presence of native antigen (HBsAg), electrochemical signals were reduced significantly because ferocene-conjugated HBsAg (HBsAg*) were replaced by native HBsAg. Under optimum conditions, the limit of detection (LOD) and linear detection range (LDR) for our biosensor were found to be 6.3 pg.mL-1 and 0.01-300 ng.mL-1. conclusions: The developed biosensor showed acceptable accuracy, selectivity, sensitivity with low detection limit and wide linear detection range. Briliant advantages of this biosensor were simplicity of assebling and stability of the produced signals. The assembly of this biosensor can be used as model for construction of other screen-printed based biosensors.

نوع سند :پایان نامه (دکتری حرفه ای )
زبان سند : فارسی
استاد راهنما :محمد جوهری اهر
دانشجو :پروین دشتی
کلیدواژه ها (فارسی):آنتی ژن- هپاتیت B -زیست حسگر
کلیدواژه ها (انگلیسی):Antigens- hepatitis B- Biosensor
موضوعات :WC بیماریهای واگیر
بخش های دانشگاهی :دانشکده داروسازی > بخش شیمی دارویی
دانشکده داروسازی > واحد پژوهش - پایان نامه های دفاع شده
کد شناسایی :13275
ارائه شده توسط : آقای فرهاد خدایی
ارائه شده در تاریخ :16 مرداد 1399 09:17
آخرین تغییر :16 مرداد 1399 09:17

فقط پرسنل کتابخانه صفحه کنترل اسناد

Document Downloads

More statistics for this item...