اتصال شیمیایی مونوکلونال آنتی بادی ریتوکسیمب و آنزیم آسپاراژیناز جهت بررسی اثر سایتوتوکسیک آن بر روی سلول های ALL

خلاصه فارسی

سرطان یکی از اصلی ترین عوامل مرگ و میر در جهان محسوب می شود. از میان سرطان های شناخته شده در جهان، سرطان خون یکی از شایع ترین و مهمترین آنها به شمار می آید. در سال های اخیر با کشف داروهای جدید، شیمی درمانی سرطان خون میسر گشته است ولی داروهای شیمی درمانی به دلیل گزینشگری پایین عوارض بالایی را از خود نشان می دهند. برای حل این مشکل داروی آسپاراژیناز با داروی منوکلونال آنتی بادی ریتوکسیمب از طریق یک لینکر کنژوگه شد و انتظار می رفت با این کار مشکل کینتیکی داروی آسپاراژیناز حل و گزینش گری آن افزایش یابد مواد و روش ها در این مطالعه، ابتدا مونوکلونال آنتی بادی ریتوکسیمب توسط لینکر مناسب از طریق تشکیل پیوند کووالانسی (آمیدی) با آنزیم آسپاراژیناز کنژوگه شد و سپس خصوصیات فیزیکوشیمیایی و عمکردی کونژوگه آسپاراژیناز-ریتوکسیمب، توسط روش های میکروسکوپی و بیولوژیک مورد بررسی قرار گرفت. جهت اثبات اثر کونژوگه بر روی سلولهای لوسمی لنفوسایتیک حاد، تستهای تعیین میزان کشندگی انجام و با گروه های کنترل مقایسه گردید. نتایج و نتیجه گیری با استفاده از لینکر مناسب کنژوگاسیون آسپاراژیناز و ریتوکسیمب انجام شد و در مقایسه با گروه کنترل آسپاراژیناز-ریتوکسیمب توانست اختصاصی عمل کند. البته پیشنهاد می گردد در کارهای آینده مطالعات حیوانی صورت گیرد تا کینتیک داروها با دقت بیشتری مورد ارزیابی قرار گیرد. در مطالعات دیگری می توان با مدل های حیوانی اثر بخشی این ترکیب جدید را مورد بحث و بررسی قرار داد.

عنوان انگليسی

Chemical Conjugation of rituximab monoclonal antibody and asparaginase for assessment of cytotoxicity on ALL cehhs

خلاصه انگلیسی

Introduction: Antibody-drug conjugates (ADCs) are emerging classes of antineoplastic agents ccrrently administered to cancer patients. Of ADCs, antibody-enzyme conjugate (AEC) is finding increasing use as a novel ADC. Methods: Here the conjugate of L-asparaginase (ASNase) and rituximab (Ritux) monoclonal antibody was synthesized using 3,3-Dithio-bis-(sulfosuccinimidyl) propionate linker. The resultant conhugate and its cytotoxic effects were demonstrated by dynamic light scattering (DLS) and optical microscopy. Results: DLS results showed that free asparaginsse and rituximab molecules respectively have the mean diameter of 3.4 and 10.2 nm. Upon conjugation with DSP, the average diameter of the conjugate increased significantly (13.6 nm). Moreover, zeta potential analysis proved the conjugation event; because zeta potential of free rituximab molecules (-3.7±3 mV) increased dramatically after conjugation with asparaginase molecules (+24±4 mV). Treatment of blood samples from acute lymphoblastic leukemia (ALL) patientswith the conjugate resulted in the apoptosis but no necrosis of ALL cells, while normal blood cells were damaged slightly. Apoptosis and necrosis events and chromatin condensation images taken by optical microscopy represent that rituximab-asparaginase conjugate affects ALL cells specifically, and only the cells that overexpress CD20 are damaged. Conclusion: This new method of conjucation can be used for efficient conjugation of monoclonal antibodies with enzyme and protein- based therapeutics. Howere, animal studies are recommended for finding effective dose and side effects.

Document Downloads