بررسی افزایش جذب رپاگلینید بارگذاری شده در نانوذرات لیپیدی جامد پوشش دار شده با کیتوزان با استفاده از مدل کشت سلول های اپیتلیال روده caco- 2 cells

خلاصه فارسی

مقدمه: دیابت شیرین ظاهراً یکی از قدیمی ترین بیماری های شناخته شده برای بشر است. يکي از داروهاي تجويزي در اين بيماري رپاگلینید است. از مشکلات عمده اين داروحلاليت پايين و فراهمي زيستي کم آن است. جهت برطرف کردن مشکلات عملکرد این دارو ، سیستم های نوین دارورسانی مورد استفاده قرار می گیرند که استفاده از نانوذرات یکی از این سیستم ها می باشد، لذا هدف از مطالعه حاضر بررسی افزایش جذب رپاگلینید بارگذاری شده در نانوذرات لیپیدی جامد پوشش دار شده با کیتوزان با استفاده از مدل کشت سلول های اپیتلیال رودهcaco2-cells بود. مواد و روش ها: در مطالعه ی انجام شده ابتدا منحنی کالیبراسیون برای داروهای رپاگلینید ،پروپرانولول و آتنولول با حل کردن داروها در حلال اتانول و با روش رقیق سازی جذب داروها در طول موج ماکسیمم با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومترتهیه وترسیم گردید. نانوذرات SLN به روش انتشار حلال تهیه شد. نانوذرات SLN حاوی دارو با کیتوزان 0.5 درصد پوشش داده شد. برای بررسی میزان جذب دارو از کشت سلول های اپیتلیال روده Caco-2 Cells استفاده شد . به این منظور سلول های Caco-2 (خریداری شده مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران )تهیه و پاساژ داه شد .سلول های پاساژ32 با مقدار 100000 سلول بر سانتی متر مربع به ترنسول حاوی فیلتر پلی کربنات داخل پلیت24 خانه انتقال داده شدند و طی 21 روز بر روی ترنسول کشت داده شدند، تا اتصالات محکم و P-gp کامل ایجاد شودو تک لایه تشکیل یابد . مقدارTEER اندازه گیری شد .جهت انجام مطالعه ،داروهای مورد نظر به بخش آپیکال ترنسول حاوی تک لایه انتقال داده شد و طی زمان 100 دقیقه ضریب نفوذ پذیری و میزان جذب داروها محاسبه شد . نتایج: منحنی های کالیبراسیون برای داروهای رپاگلینید ،پروپرانولول و آتنولول با استفاده از معادله خط بدست آمده به شکل خطی تهیه شدند . نتایج بدست آمده از مقادیر TEER تشکیل اتصالات محکم بین سلول ها را تایید کرد. جذب پروپرانولول، آتنولول، رپاگلینید و SLN حاوي رپاگلینید به ترتيب برابر 89.69 %، 1.64 %، 23.26 % و 98.84% بود. ميانگين (انحراف معيار) ضریب نفوذ پذیری بدست آمده برای داروهای مورد مطالعه در طی 100 دقیقه برای داروهای پروپرانول ،آتنولول ،رپاگلینید وSLNپوشش دار شده با کیتوزان حاوی رپاگلینید به ترتیب برابر: 0.37± 7.933×〖10〗^(-5) ، 0.0124± 1.0633×〖10〗^(-6) ، 0.0082± 2.13×〖10〗^(-5) و0.0262± 9.0266×〖10〗^(-5) بدست آمدند.براساس این نتایج بدست آمده SLN پوشش دار شده با کیتوزان به صورت معناداری ضریب نفوذپذیری داروی رپاگلینید را افزایش می دهد. نتیجه گیری: به طور خلاصه مي توان نتيجه گرفت که SLN پوشش داده شده با کيتوزان مي تواند ضريب نفوذپذيري و درصد جذب داروي رپاگلینید را به صورت قابل ملاحظه ايي افزايش دهد.

عنوان انگليسی

Investigating the increase in the uptake of repaglinide loaded in solid lipid nanoparticles coated with chitosan using the caco-cells- 2 intestinal epithelial cell culture model

خلاصه انگلیسی

Introduction: Diabetes mellitus is one of the oldest diseases known to mankind. Repaglinide is One of the prescribed drugs in this disease, the main problems of this drug is its low solubility and low bioavailability. In order to increase the absorption and bioavailability of drugs, so novel drug delivery systems were used to overcome these problems, one of these systems is the use of nanoparticles, so the purpose of this study is to investigate the increase in the absorption of Repaglinide loaded in solid lipid nanoparticles coated with chitosan using the epithelial cells culture model caco2-cells. Materials and Methods: In the conducted study, the calibration curve for Repaglinide, propranolol and atenolol drugs was prepared and plotted by dissolving the drugs in ethanol solvent and using the dilution method of the drugs at the maximum wavelength using UV spectrophotometer. SLN nanoparticles were prepared by solvent diffusion method. SLN nanoparticles containing drug were coated with 0.5% Chitosan. To check the amount of drug absorption from cell cultures Intestinal epithelial Caco-2 cells were used. For this purpose, Caco-2 cells (purchased from the National Center for Genetic and Biological Resources of Iran) were prepared. Cells of passage 32 were seeded on polycarbonate filter inserts in a 24-well plate at density of 100000cells/cm2 and grown for 21 days to allow the monolayer formation, full expression of P-gp and appropriate tight junctions. To evaluate the integrity of cellular monolayer, the transepithelial electrical resistance(TEER) was measured, with a value of more than 400 Ω cm2 and it was determined that the necessary connections were made. To conduct the study of the desired drugs, they were transferred to the apical part of the transsol containing the monolayer and during 100 minutes, the permeability coefficient and the absorption rate of the drugs were calculated. Results: Calibration curves for Repaglinide, propranolol and atenolol drugs were prepared in a linear form using the obtained line equation. The results obtained from the TEER values confirmed the formation of strong connections between the cells. respectively, 89.69%, 1.64%, 23.26% 98.84%. The mean (standard deviation) of the permeability coefficient obtained for the studied drugs during 100 minutes for propranolol, atenolol, repaglinide and SLN coated with chitosan containing Repaglinide were respectively equal 7.933×10-5±0.37, 1.0633×10-6±0.0124, 2.13×10- 5±0.0082 And 9.0266×10-5±0.00262. Based on these results, SLN coated with chitosan has a significant increases repaglinide permeability coefficient. Conclusion: In summary, it can be concluded that SLN coated with chitosan can significantly increase the permeability coefficient and absorption percentage of repaglinide drug.

Document Downloads