بررسی اثر HSP70 در القاء آپوپتوز به واسطه نانوکورکومین پلیمری در رده سلولی A-375 ملانوما

خلاصه فارسی

مقدمه: سرطان به عنوان یکی از مهم ترین عوامل مرگ در جهان شناخته میشود که سالانه حدود 10 میلیون نفر انسان را به کام مرگ میکشاند. ملانوما ، سرطان سلولهای ملانوسیت پوست میباشد که حدود 2.1 درصد از سرطانهای تشخیص داده شده در جهان را شامل میشود. روشهای درمانی مختلفی برای درمان این بدخیمی به کار برده شده است و یکی از درمان های پیشنهادی که امید است در آینده به صورت گسترده در بالین مورد استفاده قرار گیرد ، استفاده از نانوکورکومین پلیمری می باشد . تحقیقات متعددی نشان داده اند که نانوکورکومین پلیمری میتواند در درمان سرطان ها و همچنین ملانوما نقش داشته باشد. پروتئین های شوک حرارتی دسته ای از پروتئین ها هستند که در شرایط استرس زای سلولی تولید شده و باعث تسهیل چین خوردن پروتئین ها و حذف پروتئین های بد تاخورده میشود که یکی از پروتئین های این دسته که وزن 70 کیلودالتون دارد ، پروتئین های شوک حرارتی 70 می باشد. فرضیاتی مطرح است که یکی از آنها این است که کورکومین در راستای القای آپوپتوز ، باعث بد تا خوردن پروتئین ها میشود و سلولهای سرطانی برای مقاومت در برابر اثر آن ، بیان پروتئین شوک حرارتی را افزایش میدهد و در مقابل فرضیه ای دیگر مطرح میکند که افزایش بیان پروتئین های شوک حرارتی در راستای القای آپوپتوز کورکومین عمل میکند. مواد و روش ها : در شرایط آزمایشگاهی ابتدا سلولهای A375 ملانوما خریداری شد. تعداد مناسب از این سلولها درمحیط کشت مناسب ، کشت داده شدند. محلول نانوکورکومین تهیه شد و بعد از تست MTT، سلولهای A375 در ساعت های 48،24 با مقدار مناسبی از نانوکورکومین تیمار شد و 1 در گروه کنترل فقط به سلولها PBS اضافه شد. بعد از استخراج RNA ، یک جفت آغازگر تهیه شد و سپس cDNA از RNA سنتز شد . پس از آن ، جهت بررسی میزان بیان پروتئین شوک حرارتی 70 (انواع A1 و A2) ،Real Time PCR انجام شد و رسم نمودار انجام گرفت. تست آپوپتوز انجام شد و با دستگاه فلوسیتومتری ، تعداد سلولهای آپوپتوز شده مورد بررسی قرار گرفت . یافته ها : : در نتیجه مشاهده شد که تیمار سلولهای ملانوما با نانوکورکومین پلیمری باعث کاهش بیان پروتئین شوک حرارتی 70 ( انواع A1 و A2 ) خواهد شد و این کاهش بیان ، در جهت القای آپوپتوز در این دسته سلولی می باشد. نتیجه گیری : افزایش پروتئین شوک حرارتی 70 در جهت مقاومت سلولی به نانوکورکومین عمل میکند نه در جهت القای آپوپتوز

عنوان انگليسی

Evaluation of the effect of inhibition of HSP70 in induction of apoptosis by polymeric nanocurcumin in A-375 melanoma cell line

خلاصه انگلیسی

Background/Aim : Cancers are considered as one of the most important cause of death in the world and annually 10 million people all around the world die due to cancers. Melanoma is a cancer of the melanoid cells of the skin, which accounts for about 2.1% of all people diagnosed with cancers in the world. Various kinds of treatments are used for melanoma and one of the suggested treatments that we hope to be used widely in future for melanoma patients is polymeric nanocurcumin. Several researches have shown that polymeric nanocurcumin can play a role in the treatment of cancers like melanoma. Heat shock proteins are a group of proteins that are expressed under cellular stress conditions and facilitate the folding of proteins and remove misfolded proteins. One group of the proteins of HSPs that have 70kilodaltons weight named heat shock proteins 70. There are 2 hypotheses, one of which is that curcumin causes the destruction of proteins in order to induce apoptosis, and cancer cells increase the expression of heat shock protein to resist its effect. On the other hand, another hypothesis is proposed that increasing the expression of heat shock proteins acts in the direction of curcumin induction of apoptosis. Methods: A375 melanoma cells were bought. Appropriate number of these cells were cultured in appropriate culture medium. Nanocurcumin solution was prepared and after MTT test, A375 cells were treated with an appropriate amount of nanocurcumin at 75 24.48 hours, and in the control group, only PBS was added to the cells. After RNA extraction, a pair of primers was prepared and then cDNA was synthesized from RNA. After that, in order to check the expression level of heat shock 70 (types A1 and A2), Real Time PCR was performed and the graph was drawn. Apoptosis test was performed and the number of apoptotic cells was checked by flowcytometry. Results: As a result, it was shown that the treatment of melanoma cells with polymeric nanocurcumin reduced the expression of heat shock protein 70 (types A1 and A2) and this decrease in expression is aimed at inducing apoptosis in this cell lines. Conclusion: Expression of heat shock 70 acts in the direction of cell resistance to nanocurcumin, not in the direction of inducing apoptosis.

Document Downloads