بررسی تاثیر داربست نانوفیبری بارگذاری شده با ماده اولئوروپین بر القای مرگ برنامه ریزی شده در سلول های MKN-45 مقاوم به 5-فلورویوراسیل

خلاصه فارسی

زمینه: سرطان معده (gastric cancer) یکی از شایع‌ترین و کشنده‌ترین سرطان‌ها در دنیا به شمار می آید. معده در دستگاه گوارش بین مری و روده کوچک قرار گرفته و با ترشح آنزیم ، اسید معده و فاکتور جذب ویتامینB12 به هضم غذا کمک می‌کند. معده از سلول‌های اپیتلیال و غدد تشکیل شده که با غشای مخاطی پوشیده شده‌اند. یکی از روش های معمول و مرسوم در درمان سرطان به روش شیمی درمانی، استفاده از داروی 5-fluorouracil است که این دارو آنالوگ یوراسیل بوده و به محض ورود به سلول به فرم‌های فعال خود که شامل فلورودئوکسی یوریدین مونوفسفات (FdUMP)، فلورودئوکسی یوریدین تری فسفات (FdUTP) و فلورویوریدین تری فسفات (FUTP) است تبدیل شده و این فرم‌های فعال با مهار آنزیم تیمیدیلات سنتاز، به عنوان آنزیمی برای ساخت پیریمیدین‌ها، مانع از سنتز و ترمیم RNA و DNA و متعاقبا مانع از سنتز پروتئین می‌شوند. یک ترکیب اصلی در زیتون 3و4 دی هیدروکسی فنیل اتانول- النولیک اسید می باشد که به الوروپین ( Oleuropein ) معروف است.هدف این مطالعه بررسی تاثیر داربست نانوفیبری بارگذاری شده با ماده اولئوروپین بر القای مرگ برنامه ریزی شده در سلول های MKN-45 مقاوم به 5-فلورویوراسیل می باشد. هدف: 1.تعیین تاثیر سمیت داربست حاوی ماده بیواکتیو الوروپین در سلولهای MKN-45 مقاوم به 5 –فلورویوراسیل نسبت به گروه کنترل 2..تعیین تاثیر داربست حاوی ماده بیواکتیو الوروپین بر بیان ژنهای مسیر آپوپتوز (Bax،Bcl-2 و P53) در سلولهای MKN-45 مقاوم به 5 –فلورویوراسیل و مقایسه آن با گروه کنترل مواد و روش ها: پس از خریداری رده سلولی MKN-45 ،انتقال به محیط کشت درون فلاسک و چندین سری پاساژ دادن سلول ها در فاز لگاریتمی مورد استفاده قرار گرفتند. بررسی میزان بیان ژن‌های القاکننده آپوپتوز،( Bax، P53) و ژن ضد آپوپتوتیک( Bcl-2 ) با استفاده از روش Real-time PCR در سلول‌های MKN-45 مقاوم به 5-FU در شرایط برون تنی مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: در این مطالعه از داربست نانوفایبری PCL-PEG برای بارگیری داروی اولوروپین و ایجاد بستری برای رشد و تکثیر سلولها استفاده شده است. طبق نتایج حاصل از تست MTT در روز سوم پس از تیمار، رهایش دارو از داربست از روز سوم به بعد انجام می‌گیرد و تاثیر دارو بر روی سلول‌ها در تست MTT پنج روزه قابل تایید است. همچنین طبق نتایج حاصل از MTT ترکیب دو داروی اولوروپین بارگذاری شده در داربست PCL-PEG، فعالیت سایتوتوکسیسیته بالاتری نسبت به گروه دیگر از خود نشان داد. نتایج: طبق محاسبات انجام شده، سطح بیان ژن BAX و P53 در سلولهای مجاور شده با داربست حاوی اولوروپین افزایش معنی داری نسبت به گروه دیگر نشان میدهد. و سطح بیان Bcl-2 در این گروه نیز نسبت به سایر گروه ها کاهش معنی دار داشته است. افزایش Bax و P53 و کاهش Bcl-2 دلیل بر افزایش آپوپتوز در سلولهای مقاوم مجاور شده با داربست حاوی اولوروپین است. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که ترکیب داروی اولوروپین در بستر داربست نانوفایبری PCL-PEG پتانسیل مهار رشد سلول‌های سرطانی مقاوم به 5-فلورویوراسیل را دارد و میتواند به عنوان یک رویکرد مناسب برای درمان‌ سرطان معده در نظر گرفته شود.

عنوان انگليسی

Study of the effect of nanofiber scaffolds loaded with oleuropein on the induction of apoptosis in 5-fluorouracil-resistant MKN-45 cells

خلاصه انگلیسی

Background: Gastric cancer is one of the most common and deadly cancers in the world. The stomach is located in the digestive tract between the esophagus and the small intestine, and helps digestion by secreting enzymes, stomach acid, and vitamin B12 absorption factor. The stomach consists of epithelial cells and glands that are covered with a mucous membrane. One of the usual and conventional methods in the treatment of cancer by chemotherapy is the use of 5-fluorouracil, which is an analogue of uracil, and upon entering the cell, it converts into its active forms, which include fluorodeoxyuridine monophosphate (FdUMP), fluorodeoxyuridine tri Phosphate (FdUTP) and fluorouridine triphosphate (FUTP) have been converted and these active forms prevent the synthesis and repair of RNA and DNA by inhibiting the enzyme thymidylate synthase, as an enzyme for making pyrimidines, and subsequently prevent protein synthesis. A main compound in olives is 3-4 dihydroxyphenyl ethanol-allenolic acid, which is known as Oleuropein. The aim of this study is to investigate the effect of nanofibrous scaffold loaded with Oleuropein on the induction of programmed death in MKN-45 cells resistant to 5-fluorouracil. Aim: Here, we examined the effect of the scaffold containing the bioactive substance Oleoreupien on the expression of apoptotic pathway genes (Bax, Bcl-2 and P53) in MKN-45 cells resistant to 5-fluorouracil and comparing it with the control group Materials and Methods: After purchasing the MKN-45 cell line, transferring it to the culture medium inside the flask and passing several series of cells in the logarithmic phase were used. The expression level of apoptosis-inducing genes (Bax, P53) and anti-apoptotic gene (Bcl-2) was investigated using real-time PCR method in MKN-45 cells resistant to 5-FU in vitro. Results: According to the calculations, the level of BAX and P53 gene expression in cells treated with scaffolds containing oluropine shows a significant increase compared to other group. And the expression level of Bcl-2 in this group has also decreased significantly compared to other group. The increase of Bax and P53 and the decrease of Bcl-2 is the reason for the increase in apoptosis in resistant cells treated with oluropine and 5-fluorouracil. Conclusion: The results of this study showed that the combination of Oleoreupien in the PCL-PEG nanofiber scaffold has the potential to inhibit the growth of cancer cells resistant to 5-fluorouracil and can be considered as a suitable approach for the treatment of gastric cancer.

Document Downloads