بررسی تاثیر داربست نانوفیبری بارگذاری شده با ماده اولئوروپین بر القای بیان ژن های مرتبط با اتوفاژی در سلول های MKN-45 مقاوم به 5-فلورویوراسیل

خلاصه فارسی

سرطان معده (gastric cancer) یکی از شایع‌ترین و کشنده‌ترین سرطان‌ها در دنیا به شمار می آید. معده در دستگاه گوارش بین مری و روده کوچک قرار گرفته و با ترشح آنزیم ، اسید معده و فاکتور جذب ویتامین B12 به هضم غذا کمک می‌کند. معده از سلول‌های اپیتلیال و غدد تشکیل شده که با غشای مخاطی پوشیده شده‌اند. یکی از روش های معمول و مرسوم در درمان سرطان به روش شیمی درمانی، استفاده از داروی 5-fluorouracil است که این دارو آنالوگ یوراسیل بوده و به محض ورود به سلول به فرم‌های فعال خود که شامل فلورودئوکسی یوریدین مونوفسفات (FdUMP)، فلورودئوکسی یوریدین تری فسفات (FdUTP) و فلورویوریدین تری فسفات (FUTP) است تبدیل شده و این فرم‌های فعال با مهار آنزیم تیمیدیلات سنتاز، به عنوان آنزیمی برای ساخت پیریمیدین‌ها، مانع از سنتز و ترمیم RNA و DNA و متعاقبا مانع از سنتز پروتئین می‌شوند. یک ترکیب اصلی در زیتون 3و4 دی هیدروکسی فنیل اتانول- النولیک اسید می باشد که به الوروپین (Oleuropein) معروف است. هدف: هدف این مطالعه بررسی تاثیر داربست نانوفیبری بارگذاری شده با ماده اولئوروپین بر القای مرگ بیان ژن های مرتبط با اتوفاژی در سلول های MKN-45 مقاوم به 5-فلورویوراسیل می باشد. مواد و روش ها: پس از خریداری رده سلولی MKN-45 ،انتقال به محیط کشت درون فلاسک و چندین سری پاساژ دادن سلول ها در فاز لگاریتمی مورد استفاده قرار گرفتند. بررسی میزان بیان ژن‌های القاکننده اتوفاژی( Beclin-1 ،LC3) با استفاده از روش Real-time PCR در سلول‌های MKN-45 مقاوم به 5-FU در شرایط برون تنی مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: در این مطالعه از داربست نانوفایبری PCL-PEG برای بارگیری داروی اولئوروپین و ایجاد بستری برای رشد و تکثیر سلولها استفاده شده است. طبق نتایج حاصل از تست MTT در روز سوم پس از تیمار، رهایش دارو از داربست از روز سوم به بعد انجام می‌گیرد و تاثیر دارو بر روی سلول‌ها در تست MTT هفت روزه قابل تایید است. همچنین طبق نتایج حاصل از MTT ترکیب دو داروی 5-فلورویوراسیل و اولئوروپین بارگزاری شده در داربست PCL-PEG، فعالیت سایتوتوکسیسیته بالاتری نسبت به سایر گروه ها از خود نشان داد. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که ترکیب دو داروی 5-فلورویوراسیل و داروی اولئوروپین در بستر داربست نانوفایبری PCL-PEG پتانسیل مهار رشد سلول‌های سرطانی مقاوم به 5-فلورویوراسیل را دارد و میتواند به عنوان یک رویکرد مناسب برای درمان‌ سرطان معده در نظر گرفته شود.

عنوان انگليسی

Study of the effect of nanofiber scaffolds loaded with oleuropein on the induction of autophagy in 5-fluorouracil-resistant MKN-45 cells

خلاصه انگلیسی

Background: Gastric cancer is one of the most common and deadly cancers in the world. The stomach is located in the digestive tract between the esophagus and the small intestine, and helps digestion by secreting enzymes, stomach acid, and vitamin B12 absorption factor. The stomach consists of epithelial cells and glands that are covered with a mucous membrane. One of the usual and conventional methods in the treatment of cancer by chemotherapy is the use of 5-fluorouracil, which is an analogue of uracil, and upon entering the cell, it converts into its active forms, which include fluorodeoxyuridine monophosphate (FdUMP), fluorodeoxyuridine tri Phosphate (FdUTP) and fluorouridine triphosphate (FUTP) have been converted and these active forms prevent the synthesis and repair of RNA and DNA by inhibiting the enzyme thymidylate synthase, as an enzyme for making pyrimidines, and subsequently prevent protein synthesis. A main compound in olives is 3-4 dihydroxyphenyl ethanol-allenolic acid, which is known as Oleuropein. Aim: The aim of this study is to investigate the effect of nanofibrous scaffold loaded with Oleuropein on the induction of programmed death in MKN-45 cells resistant to 5-fluorouracil. Materials and Methods: After purchasing the MKN-45 cell line, transferring it to the culture medium inside the flask and passaging several series of cells in the logarithmic phase were used. The expression level of apoptosis-inducing genes (Bax, P53) and anti-apoptotic gene (Bcl-2) was investigated using real-time PCR method in MKN-45 cells resistant to 5-FU in vitro. Results: In this study, PCL-PEG nanofiber scaffold was used to load oluropin drug and create a platform for cell growth and proliferation. According to the results of the MTT test on the third day after the treatment, the release of the drug from the scaffold is carried out from the third day onwards, and the effect of the drug on the cells can be confirmed in the 7-day MTT test. Also, according to the results of MTT, the combination of two drugs 5-fluorouracil and oluropine loaded in PCL-PEG scaffold showed higher cytotoxic activity than other groups. Conclusion: The results of this study showed that the combination of 5-fluorouracil and simvastatin in the PCL-PEG nanofiber scaffold has the potential to inhibit the growth of cancer cells resistant to 5-fluorouracil and can be considered as a suitable approach for the treatment of gastric cancer.

Document Downloads