بررسی کارایی سه روش مختلف استخراج DNA بروسلا از سرم به روش PCR

خلاصه فارسی

سابقه و هدف: بروسلوز انسانی در بسیاری از کشورهای جهان از جمله ایران، یک مشکل اساسی بهداشت جامعه می باشد. تابلوی بالینی بروسلوز بسیار غیر اختصاصی بوده و تشخیص آن به تائید آزمایشگاهي نیازمند می باشد. کشت خون معیار طلائی جهت تشخیص بیماری می باشد با این وجود حساسیت این روش کم می باشد. از طرف دیگر، تست های سرولوژیک در مناطق اندمیک بیماری ازحساسیت مناسبی برخوردار نیستند. ابداع روش های جدید تشخیصی که دارای حساسیت بالائی باشند و خطر عفونت در پرسنل آزمایشگاه را به حد اقل برسانند، از اهمیت زیادی برخوردارشده اند. واکنش زنجیره ای پلی مراز از جمله روش هائی است که این مزایا را دارا می باشد. ما در این مطالعه، به مقایسه سه روش مختلف ردیابی نسبی DNA باکتری بروسلا در سرم پرداختیم. مواد و روشها: نمونه های سرم انسان بطور مصنوعی با غلظت های مشخصی از باکتری بروسلا تلقیح شدند. DNA با سه روش استخراج شد و با PCR اختصاصی جنس بروسلا مورد آزمایش قرار گرفت. یافته ها: یافته های ما نشان داد که پروتکل کیت سیناژن در مقایسه با دو روش دیگر در رقت های پایین تری از DNA بروسلا قادر به ردیابی DNA این باکتری در سرم می باشد. نتيجه گيري: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه کیت سیناژن روش ارجح در استخراج بوده و دارای حساسیت بهتر برای جداسازی DNA بروسلا از نمونه های سرم می باشد.

عنوان انگليسی

Comparison of Three DNA Extraction Methods of the Detection of Brucella DNA from Human Serum Samples

خلاصه انگلیسی

Background and objective: Human Brucellosis is a significant public health problem in many countries including Iran. The clinical picture of brucellosis is very nonspecific, and its diagnosis requires laboratory confirmation. However, blood culture, the gold standard for diagnosis, lack sensitivity, and serological tests are not specific enough in area where the disease is endemic. The development of new diagnostic techniques, with high sensitivity and minimize risk of laboratory infection, have of grant importance. PCR is one of the procedures, which have these advantages. We compared the relative recovery of extraction of Brucella DNA from serum by three different Methods. Materials and Methods: Human serum samples were spiked with known concentration of Brucella Melitensis. The DNA was extracted by three methods and tested by a genus-specific PCR Method. Results: Our results showed that the cinneagen kit protocol, compare with others protocols, detected Brucella DNA in lower serum concentration. Conclusion: According to the study, the cinnagen kit was the preferred assay that yields the best sensitivity for isolation of brucella DNA for serum samples.

Document Downloads