استفاده از خصوصیت های متفاوت جدا شدن سلول برای تهیه کشت های خالص سلول شوآن

Persian Abstract

پیش زمینه: سلولهای شوآن(SCs) می توانند برای ترمیم سیستم عصبی مرکزی و محیطی به کار رود. بنابراین ،ایجاد روشی برای به دست آوردن سلول های شوآن فعال با قابلیت تکثیر بالا ؛ در یک بازه زمانی مناسب برای کاربردهای کلینیکی، از نیازهای اولیه می باشد. آلودگی فیبروبلاستی غالب در کشت آزمایشگاهی سلول شوآن مسئله اصلی در تخلیص این سلول هاست. روشها:این بررسی یک روش موثر و جدید را برای غنی سازی سلولهای SC با استفاده از خصوصیات جدا شدن متمایز گونه های مختلف سلولی از کف ظروف کشت معرفی می‌‌‌‌کند. در کشتها، سلولها با دو محیط مختلف و کلاتور EGTA مورد تیمار قرار گرفتند که باعث کنده شدن و تفکیک سریعتر سلولهای SC از سلولهای فیبروبلاست شده و جداسازی SCs را تسهیل می‌کند. نتایج:در عرض 7 روز ، مقادیر زیادی از سلولهای SC با خلوص بیش از 99 % به دست آمد. داده های حاصل به روش های رنگ آمیزی و فلوسایتومتری با مارکر اختصاصی سلول های شوآن، p75LNGFR، تایید گردید. کل پروسه در حدود21 روز انجام می گیرد. نتیجه گیری: نتایح ما نشان می دهد که استفاده از ویژگی جداشدن متفاوت سلولهای SC و فیبروبلاست می تواند به عنوان روشی مفید برای به دست آوردن سلولهای SC هموژن با کیفیت بالا در یک بازه زمانی مناسب به کار رود.

Title

Exploiting cell detachment properties to obtain highly enriched cultures of adult rat Schwann cells

English Abstract

Objective: Schwann cells (SCs) can be used to repair both the peripheral and central nervous systems. Therefore, establishment of a procedure to obtain activated, highly proliferative SCs, in an appropriate time for clinical applications, is a prerequisite. Purification is complicated by contamination with fibroblasts which often become the predominant cell type in an in vitro SC culture. Methods: This study describes a novel and efficient method to enrich SCs by utilizing the differential detachment properties of the two cell types. In culture, cells were treated with two different media and the chelator, EGTA, which detached SCs faster than fibroblasts and allowed for easy isolation of SCs. Results: Within seven days, high yields of SCs with a purity of greater than 99% were achieved. This was confirmed by immunostaining characterization and flow-cytometric analyses using an antibody against the p75 low affinity nerve growth factor receptor (p75LNGFR). The entire procedure was completed in approximately 21 days. Conclusions: Our study shows that the use of differential detachment properties of SCs against fibroblasts could be considered to be one of the procedures for obtaining a large quantity of homogenous SCs within a plausible time frame.

Document Downloads