تاثير غلظت‌های مختلف ال- ترانس رتينوئيک اسيد بر رشد و بقای سلول‌های بنيادی فوليکول‌ موی موش سوری

Persian Abstract

زمينه و هدف: سلول‌های بنيادی فوليکول مو چند توان هستند و در ناحيه‌ی بالج واقع در فوليکول مو قرار دارند. اين سلول‌ها قدرت تکثيری بالايی دارند. رتينوييد‌ها باعث متمايز شدن سلول‌های اپيدرم و کراتينه شدن آن‌ها می‌شود. ال- ترانس رتينوئيک اسيد برای درمان برخی بيماری‌های پوستی نظير ملاسما، ايکتيوز و اکنه استفاده می‌شود، لذا مطالعه‌ی تاثير ال- ترانس رتينوئيک اسيد روی سلول‌های بنيادی فوليکول مو و تعيين غلظت موثر آن برای بقای سلول‌های بنيادی فوليکول مو ضروری به نظر می‌رسد. روش بررسی: در اين مطالعه، سلول‌های بنيادی فوليکول موی مشتق از سبيل موش سوری Balb/c بعد از جداسازی و کشت در آزمايشگاه، تحت تيمار غلظت‌های مختلف ال- ترانس رتينوئيک اسيد قرار گرفتند. غلظت‌های 5/0 تا 20 (به ترتيب: 5/0،1، 5، 10، 15 و 20) ميکرومولار ال- ترانس رتينوئيک اسيد برای بررسی اثرات مهاری يا تکثيری مورد بررسی قرار گرفت. اثرات سيتوتوکسيسيتی رتينوئيک اسيد، با استفاده از روش MTT بررسی شد. جهت بررسی مرگ و مير و بقا‌ی سلول‌ها، از روش رنگ‌آميزی آکريدين اورنج/اتيديوم برمايد استفاده شد و نتايج با ميکروسکوپ فلورسنت مورد بررسی قرار گرفت و تعداد سلول‌های زنده، آپوپتوتيک و نکروتيک با استفاده از نرم‌افزار Image J شمارش شدند. يافته‌‌ها: نتايج حاصل از رنگ آميزی نشان داد که غلظت 10 ميکرومولار و بالاتر ال- ترانس رتينوئيک اسيد باعث مرگ آپوپتوتيک و نکروتيک سلول‌های بنيادی فوليکول مو می‌شود و مقدار IC50 به‌دست آمده از منحنی پاسخ غلظت، 3/14 ميکرومولار بود. نتيجه‌گيری: يافته‌های اين مطالعه نشان داد که سلول‌های بنيادی فوليکول موی موش سوری در صورتی‌که در آزمايشگاه، تحت تاثير غلظت‌های بالاتر از ده ميکرومولار قرار گيرند با مرگ آپوپتوز يا نکروز از بين می‌روند و لذا از غلظت‌های بالاتر ال- ترانس رتينوئيک اسيد می‌توان جهت از بين بردن موه‌های زايد استفاده کرد و از غلظت‌های پايين اين ماده هم می‌توان جهت درمان بيماری‌های پوستی استفاده کرد.

Title

The Effect of Different Concentrations of All-Trans Retinoic Acid on the Growth and Survival of Mouse Hair Follicle Stem Cells

English Abstract

Background and Objective: Hair follicle stem cells are multipotent, located in the bulge area, and are highly proliferating. Retinoids have an effect on epidermal differentiation and keratinization. Retinoic acid is used to treat some skin diseases such as Melasma, Acne and Ichthyosis. So, the study of all-trans retinoic acid effect on hair follicle stem cells and determination of the effective concentration of retinoic acid on hair follicle stem cell survival seems to be essential. Materials and Methods: In this study, we isolated and cultured hair follicle stem cells derived from Balb/c mice Whisker follicles. Then, the cells were treated with different concentrations of all-trans retinoic acid. 0.5 to 20 µM of all-trans retinoic acid was used to evaluate inhibitory or proliferative effects. MTT assay was used to evaluate cytotoxicity of all-trans retinoic acid. To investigate cell death and survival, we used acridine orange/ethidium bromide staining method. The results were analyzed by fluorescent microscopy. Apoptotic and necrotic cell numbers were counted using Image J software. Results: Results indicated that apoptotic, rather than necrotic, cell death was caused by 10µM and higher concentrations of retinoic acid. The IC50 value determined by the dose response curve was found to be 14.3 µM. Conclusion: Results of this study indicate that if hair follicle stem cells expose to high concentrations of all-trans retinoic acid, the cells may undergo apoptotic or necrotic cell death. Therefore, higher concentrations of retinoic acid can be used to eliminate redundant hairs and low concentrations can be used for the treatment of skin diseases

Document Downloads