اثر اسيد رتینوئیک روی بقا و تمایز نورونی سلولهای بنیادی فولیکول موی موش صحرایی

Persian Abstract

مقدمه: امروزه مطالعات بر روی بیولوژی سلولهای بنیادی متمرکز شده است و امید آن می رود که نتایج حاصل از این تحقیقات نقش مهمی در درمان بسیاری از بیماریهای غیر قابل علاج داشته باشد. سلولهاي بنيادي مي توانند از منابع مختلفی مثل منطقه ی بالج فولیکول مو مشتق شوند. منطقه ی بالج فولیکول مو منبعی در دسترس از سلولهای بنیادی با توان تکثیری بالا می باشد. هدف از اين مطالعه جداسازی و کشت سلولها ی بنیادی فولیکول مو از ناحیه ی بالج فولیکول مو و ارزیابی روشهای مختلف القا تمایز نورونی در سلولهای بنیادی فولیکول مو بود. مواد و روش ها: ناحیه بالج فولیکول موی موش صحرایی جدا شد و در محیط کشت DMEM/F12 حاوی EGF، کلراتوکسین و FGF-2 کشت داده شد. اثرات سیتوتوکسیک رتینوئیک اسید با استفاده از 3(4،5-دی متیل تیازول)-2-5 دی فنیل تترازولامید بروماید (روش MTT) مورد بررسی قرار گرفت. نهایتا با استفاده از روش RT-PCR بیان CD34 و Nestin و همچنین Map2 و GFAPبه عنوان مارکرهای نورال ،مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: نتایج ما نشان داد که سلولهای بنیادی فولیکول موی تمایز نیافته، نستین و CD34 را که نشانگرهای بنیادی هستند بیان کردند و در سلولهای تیمار شده با رتینوئیک اسید باندهای قوی تری از بیان این مارکرهادیده شد. رتینوئیک اسید در غلظت های بالا منجر به کاهش میزان حیات سلولی شد و در سلولهایی که با دوز FBS یک درصد تیمار شده بودند، نسبت بیان Bax به بیان Bcl2 افزایش یافت. رتینوئیک اسید با غلظت یک میکرومول منجر به تظاهر بیان Map2 و نه بیان GFAP و القا نوروژنز در سلولهای بنیادی فولیکول مو شد . نتیجه گیری :یافته های ما بیانگر این بود که سلولهای بیان کننده ی نستین و CD34 در ناحیه ی بالج فولیکول مو، ویژگی های مشابه سلولهای بنیادی را داشتند و توانستند به طور کارآمدی در حضور رتینوئیک اسید(با غلظت یک میکرومول) سلولهای نورونی را ایجاد کنند. این دست آوردها قطعا یافته ی مهمی برای درمان بیماری های نورودژنراتیو می باشد.

Title

Effect of Retinoic acid on viability and neural differentiation of mouse hair follicle stem cells

English Abstract

Objective: Nowadays studies have focused on stem cell biology and it is hoped that the results of this research have an important role in the treatment of many diseases are incurable. Adult stem cells can be derived from many adult tissue sources. In this study we used Bulge region of mouse hair follicle because, it is containing a high proliferative potential and easy accessibility sources of stem cells, to investigate neural differentiatoin of this cells . Different methods was used to induction of neural differentiation on Stem cells. In this study we conducted to isolate and culture of the bulge cells from mouse hair follicules and treatment with retinoic acid to determine its effects on neural differentiation and proliferation of bulge stem cells. Material and Methodes : The bulge region of mouse whiskers was isolated and cultured in DMEM/F12 supplemented with EGF, Choleratoxin and FGF-2 . Cytotoxic effects of all-trans retinoic acid (RA) were evaluated using 3-(4, 5-Dimethylthiazol-2-yl)-2, 5 diphenyltetrazolium bromide (MTT). In the present study, characterization of neural and glial cells derived from HFSCs was performed by means of phase-contrast microscope and RT-PCR analysis. Results: Our results showed that undifferentiated HFSCs expressed nestin and CD34 stemness genes, the neural like cells derived from HFSCs expressed MAP2, also in RA treated cells, GFAP did not expressed. In addition, RA (1µM) was promoted neurogenesis, that instead increasing RA concentration showed pronounced cell death. we studied the expression of Bcl2 and Bax in this cells to investigate the effect of Retinoic acid on proliferation and Apoptosis. Our results showed that Retinoic acid can improve proliferation in comparison with Apoptosis in this stem cells. Conclusion: Our findings indicated that nestin and CD34 expressing cells in the bulge of the hair follicle have stem cell-like properties and can effectively generate cells of neural lineage in the presence of RA(1µM). These data should be an important tool for the treatment of a variety of neurodegenerative diseases.

Document Downloads