تمایز نورونی سلولهای بنیادی فولیکول موی CD34 مثبت با استفاده از چندین روش القاگر نورونی (Serum free, Woodbury, Retinoic acid

خلاصه فارسی

سلولهای بنیادی فولیکول مو چند توان هستند و چندین سال است که ناحيه بالج واقع در فولیکول مو به عنوان منبع سلولهای بنیادی شناخته شده است.سلولهای بنیادی چند توان توانائی تمایز یافتن به انواع محدودتری از سلولها را دارند و قادر به ایجاد جنین کامل نیستند.تمایز سلولهای بنیادی فولیکول مو به سلولهای نورونی و گلیال، یکی از روش های امیدبخش جهت درمان بیماریهای سیستم عصبی محسوب میشود.تمایز پدیده ای است که سلولها طی مراحلی تغییر وضعیت داده و خصوصیات ساختمانی و فیزیولوژیکی ویژه و جدیدی را برای خود کسب می کنند.محصول پدیده تمایز تشکیل انواع مختلف بافتها و اندام های جنینی می باشد. در این مطالعه از روشهای مختلف جهت تمایز سلولهای بنیادی فولیکول مو استفاده شد. در این مطالعه ناحیه بالج جدا شد و در محیط کشت DMEM/F12 عمومی، کشت داده شد، سپس اثرات سیتوتوکسیک رتینوئیک اسید با روش MTT و روش آکریدین اورنج/ اتیدیوم بروماید مورد بررسی قرار گرفت، سلولها با سه روش القاگر نورونی تیمار شدند و روش ایمنوسیتوشیمی جهت بررسی بیان مارکرهای نورونی (MAP2) و گلیال (GFAP) مورد استفاده قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که غلظت 10 میکرومولار و بالاتر، ال- ترانس رتینوئیک اسید باعث مرگ آپوپتوتیک سلولهای بنیادی فولیکول مو میشودو به طورتقريبي با غلظت 6/0±3/14 ميكرومولار برميلي ليترازرتینوئیک اسید تمام ترانس موجب القاي 50 درصد مرگ سلولی ميشود.همچنین در این مطالعه سلولهای بنیادی CD34 مثبت جدا شدند و این سلولها توانایی تشکیل کلونی خوبی داشتند. همچنین از بین چندین روش بکار رفته در تمایز سلولی، یک میکرو مولار رتینوئیک اسید و محیط بدون سرم باعث تمایز نورونی بهتری نسبت به گروه کنترل شدند و فقط در محیط بدون سرم تمایز گلیال خوبی مشاهده شد. یافته های این مطالعه نشان داد که سلولهای بنیادی فولیکول موی موش سوری در صورتی که در آزمایشگاه، تحت تاثیر غلظتهای بالاتر از ده میکرومولار رتینوئیک اسید قرار گیرند با مرگ آپوپتوز از بین می روند. همچنین غلظت یک میکرومولار رتینوئیک اسید و محیط بدون سرم باعث القا نورونی میشوند و به نظر میرسد این دو روش القا نورونی، مدلهای القا نورونی موثری در تمایز نورونی سلولهای بنیادی فولیکول مو محسوب میشوند.

عنوان انگليسی

Neural differentiation of CD34+ hair follicle stem cells by using different inducer methods (Serum free, Woodbury, Retinoic acid)

خلاصه انگلیسی

The bulge region of the hair follicle has been reported as a putative source of hair follicle stem cells (HFSC) for many years. The differentiation of Hair Follicle stem cells (HFSCs) into neurons and glial cells represents a promising cell-based therapy for neurodegenerative diseases. In the present study, was evaluated for new methods that might influences neural differentiation of HFSCs. Bulge stem cells were isolated and cultured in DMEM/ F12. In this study, cytotoxic effects of all trans retinoic acid (ATRA) were evaluated. Cell survival was evaluated using MTT and acridine orange/ ethidium bromide (AO/EB) assays. In the present study, we compared the effects of ATRA, serum free, other chemical compounds treatmentsupon neuronal and glial differentiation of HFSCs. Subsequently, immunocytochemistry were also employed to detect expression of a neural stem cells marker (MAP2), and a glial marker (GFAP). Results showed that apoptotic cells in hair follicle stem cells caused by 10 µM and higher doses of retinoic acid.The IC50 value determined by the dose response curve was found to be 14.3±0.6 µM. In this study, CD34+ HFSCs were isolated, and these cell formed clonies in vitro. In addition, among the media tested both 1 µM of ATRA and serum free supported the neural differentiation most effectively. Furthermore, inserum free medium, glial cells were seen. The findings indicate that if the hair follicle stem cells exposed to high doses of all-trans retinoic acid, the cells may be undergo apoptotic cell death the HFSCs are heterogeneous cell populations expressing cell-surface markers for stem cells. Also, lower concentration of ATRA(1µM) and serum free media induced neural differntiation and we propose that this type of neural induction approaches, would make an excellent model for neural induction of HFSCs.

Document Downloads