ارزيابی نشانگرهای سطحی و ژن های وابسته به آن ها در سلول های بنيادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسانی

خلاصه فارسی

سابقه و هدف: ژله وارتون بند ناف منبع غنی و در دسترسی از سلول‌های بنيادی است که قدرت تکثير و تمايز بالايی دارد. هدف از ‏تحقيق حاضر، ارزيابی نشانگرهای سطحی و ژن‌های وابسته به آن‌ها در سلول‌های بنيادی مزانشيمی ژله وارتون بود.‏ مواد و روش‌ها: قطعاتی از ژله وارتون بند ناف انسانی تشريح و در محيط ‏DMEM‏ (‏Dulbecco's modified Eagle's ‎medium‏) حاوی سرم جنين گاوی (‏Fetal bovine serum‏ يا ‏FBS‏) 20 درصد کشت داده شد. سپس آن دسته از سلول‌های بنيادی ‏مهاجرت کرده از کناره‌های اين قطعات دوباره در محيط ‏DMEM‏ حاوی ‏FBS‏ 10 درصد کشت و پاساژ داده شدند. در نهايت، ‏نشانگرهای سطحی و ژن‌های وابسته به آن‌ها در سلول‌های بنيادی مزانشيمی ژله وارتون به روش فلوسايتومتری و نيز ‏RT-PCR‏ ‏(‏Reverse-transcriptase polymerase chain reaction‏) مورد بررسی قرار گرفت.‏ يافته‌ها: 7-5 روز بعد از کشت، سلول‌های بنيادی شروع به مهاجرت از قطعه بافتی کشت داده شده کردند و پس از 18-16 روز به ‏تراکم سلولی 80 درصد رسيدند. مشاهدات ميکروسکوپی سلول‌های بنيادی در کشت اوليه دو جمعيت متفاوت، سلول‌های شبه ‏فيبروبلاستی و شبه اندوتليالی پهن را نشان داد. تحليل فلوسايتومتری به روش رنگ‌آميزی دوگانه بيان نشانگرهای سطحی 44‏CD، ‏‏73‏CD، 90‏CD‏ و 105‏CD‏ و عدم بيان 34‏CD‏ و 45‏CD‏ را در اين سلول‌ها به تصوير کشيد. يافته‌های ‏RT-PCR‏ نيز نشان داد که بيان ‏اين نشانگرها در پاساژهای مختلف تغييری نکرد.‏ استنتاج: سلول‌های بنيادی ژله وارتون از مورفولوژی سلول‌های مزانشيمی برخوردار هستند و نشانگرهای سطحی مربوط به آن‌ها را ‏بيان می‌کنند. هم‌زمان، نشانگرهای سطحی سلول‌های بنيادی خون‌ساز در آن‌ها بيان نمی‌شود.‏

عنوان انگليسی

Evaluation of surface markers and related genes of the human umbilical cord derived Wharton’s jelly mesenchymal stem cells

خلاصه انگلیسی

Background and purpose: Umbilical cord derived Wharton's jelly is an enriched and accessible ‎source of stem cells with highly proliferative and differentiation potential. This study aimed to evaluate the ‎surface markers and related genes of the stem cells isolated from the human Wharton's jelly.‎ Materials and methods: Explants of the human umbilical cord derived Wharton's jelly was dissected ‎and cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) supplemented with 20% Fetal bovine serum ‎‎(FBS). Then, those cells migrated from explant's boundary were replated and passaged in DMEM containing ‎‎10% FBS. Finally, by using flowcytometry and (Reverse–transcriptase polymerase chain reaction) RT-PCR ‎techniques different surface markers and related genes were analyzed.‎ Results: 5-7 days post-plating, the stem cells initiated the migration from cultured explants and ‎showed up to 80% densities on days 16-18. Light microscopy demonstrated two distinct cell populations ‎including fibroblast-like and flat endothelial-like cells. Dual staining with flowcytometry also revealed that ‎the cultured cells were found to be positive for CD44, CD73, CD90, CD105 and negative for CD34 and CD45. ‎RT-PCR showed no changes in CD marker expression pattern during different passages.‎ Conclusion: Human Wharton's jelly derived stem cells appear mesenchymal cell morphology and ‎express related surface markers but no hematopoietic stem cell markers.‎

Document Downloads