تاثیر سلنو-ال-متیونین و سدیم سلنیت بر فعالیت آنزیم تلومراز در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از ژله وارتون بند ناف انسان

Persian Abstract

زمینه و هدف سلنیم به بدلیل خاصیت ضد سرطانی و تاثیر آن بر فعالیت تلومرازی یک هدف موثر در جهت درمان به شمار می آید. هدف از این تحقیق تاثیر دو ماده تحت عنوان سدیم سلنیت و سلنو-ال-متیونین بر فعالیت تلومرازی سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسان و مطالعه آنها به دو روش کمی و کیفی میباشد. روشها پس از جداسازی و گسترش سلول های بنیادی ناحیه ژله وارتون بند ناف انسانی به روش کشت قطعه ای، ابتدا فعالیت تلومرازی در پاساژ های صفر تا سه مورد ارزیابی قرار گرفت و بعد از سلولهای پاساژ دو جهت بررسی اثرات سلنو-ال-متیونین و سدیم سلنیت بر فعالیت تلومرازی این سلول ها در غلظت های مختلف استفاده شد و در نهایت نتایج حاصل توسط دو روش کیفی TRAP assay و کمی TRAP assay qRT- مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج چرخه آستانه سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسان در پاساژ 2 ،7/0±24/27 بوده که به طور قابل توجهی کمتر از سایر پاساژها مشاهده شد. نتایج بدست آمده از دو روش کمی و کیفی نشان داد که چرخه آستانه سلول های تیمار شده با غلظت های 5/0 و 75/0 میکرومولار سدیم سلنیت به ترتیب 7/0±73/24 و9/0±25/22 بوده که تفاوت قابل توجهی با گروه تیمار نشده داشت(58/0±05/27). درحالیکه سلنو-ال-متیونین چرخه آستانه را از 77/0±45/30 در غلظت 20 میکرومولار به 34/0±61/31 و01/1±99/31 به ترتیب در غلظت های 40 و80 میکرومولار افزایش داده بود(p<0.05). نتیجه گیری سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسان دارای بیشترین فعالیت تلومرازی در پاساژ 2 بوده که با تاثیر سدیم سلنیت به صورت وابسته به غلظت باعث افزایش فعالیت تلومرازی و سلنو-ال-متیونین به صورت وابسته به غلظت باعث کاهش فعالیت تلومرازی می شود. واژگان کلیدی:

Title

The effect of sodium selenite and seleno-l-methionine on telomerase activity of human wharton’s jelly derived mesenchymal stem cell

English Abstract

Background and aim: Selenium has anticancer properties which affects on telomerase activity, hence, it can be used as a therapeutic agent in cancer condition . This study was aimed at investigating the effect of sodium selenite and Seleno-L-methionine on the telomerase activity of the human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells by quantitative and qualitative methods. Methods: Following isolation and expansion of the stem cells from the Wharton’s jelly of the human umbilical cord by using the explant culture, passage 0-3 were selected to evaluate the telomerase activity . Then, p2 cells were exposed to sodium selenite and seleno-l-methionine at different doses and their telomerase activity was measured by TRAP-assay and quantitative RT-TRAP assay Results: The threshold cycle (CT) for the HUCMSCs at passage 2 appeared to be 27.24±0.7 that was significantly less than the other passages .Both quantitative and qualitative methods revealed the the CTs for the cells exposed to 0.5 and 0.75 sodium selenite were 24.73±0.7 and22.25±0.9, respectively that significantly were different from untreated cells (27.05±0.58). it has been also shown that the seleno-l methionine raised the CTs from30.45±0.77 at 20 μM to 31.61±0.34 and 31.99±1.01 at 40 and 80 μM, repectively. (p<0.05) Conclusion: The telomerase activity of HUCMSCs in passage 2 is more than the other passages and sodium selenite in a dose dependent manner increased the telomerase activity e but seleno-l-methionine decreased this action

Document Downloads