جدا سازی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از پالپ دندان به روش هضم آنزیمی بافت پالپی

Persian Abstract

عنوان : جدا سازی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از پالپ دندان به روش هضم آنزیمی بافت پالپی مقدمه: امروزه سلول های بنیادی مزانشیمی به عنوان منبع بی نظیر سلول های بنیادی بزرگسالان در نظر گرفته می شود که معمولا با کمترین مسائل اخلاقی در دسترس می باشد. این سلول ها جهت بررسی بیولوژی سلول های بنیادی، روند تمایز آن ها به دیگر سلول ها، مهندسی بافت، پزشکی ترمیمی و درمان های نوین سرطان مورد استفاده می باشد. هدف از تحقیق حاضر جدا سازی سلول های بنیادی پالپ دندان و تایید ویژگی های مزانشیمی آن به روش های معمول می باشد. مواد و روش ها: پس از تهیه دندان ها، اتاقک پالپ نمایان و بافت پالپ بوسیله آنزیم کلاژناز تیپ چهار، هضم گردید. سپس، سلول های جدا شده از پالپ دندان در محیط αMEM، حاوی 15% سرم جنین گاوی قرار داده شد و در دمای °C 37، رطوبت 95% و CO2 5% کشت داده شدند. قدرت تمایز سلولهای بنیادی پالپ در محیط های تمایزی استخوانی و چربی مورد ارزیابی قرار گرفت. درصد بیان نشانگر های CD90وCD45 به روش فلوسایتومتری بررسی شد. یافته ها: سلول های بنیادی مشتق از پالپ دندان قابلیت اتصال خوبی داشتند و پتانسیل تکثیری بالای از خود نشان دادند. رنگ آمیزی Alizarin red و Oil red نشان داد که این سلولها در شرایط مساعد، می توانند به ترتیب تمایز استئوژنیک و آدیپوژنیک داشته باشند. سلول های جداسازی شده از پالپ دندان با درصد بالا نشانگر CD90 را بیان می کردند؛ حال آنکه درصد بیان CD45، که نشانگر سلول های هماتوپویتیک می باشد، در این سلول ها ناچیز بود. نتیجه گیری: سلول های جداسازی شده از پالپ دندان، ویژگی های سلول های بنیادی مزانشیمی را دارا هستند.

Title

Isolation of human dental pulp derived mesenchymal stem cell implementing enzymatic digestion

English Abstract

Introduction: Nowadays, mesenchymal stem cells are considered as a unique source of adult stem cells which is usually accessible with minimum ethical concerns. These cells could be applied in stem cell biology, differentiation into other cells, tissue engineering, regenerative medicine and forthcoming cancer treatment research. The aim of the present study was to isolate dental pulp derived stem cells (DPSCs), characterize them with common techniques. Materials and Methods: After collecting teeth, the pulp chamber exposed and pulp tissue digested with collagenase IV enzyme. Then, dental pulp derived cells were resuspended and incubated in alpha modified minimum essential medium eagle (αMEM) supplemented with 15% fetal bovine serum at 37°C temperature, 95% humidity and 5% CO2. The osteogenic and adipogenic differentiation potentials for dental pulp derived cells were assessed in appropriate conditions. Flow-cytometry analyses were utilized to evaluate the percentage of CD90 and CD45 positive markers within isolated cells. Results: Dental pulp derived cells had appropriate attachment to the culture vessels and showed the high proliferation rate on culture condition. These cells were proper to bone and fat differentiation as displayed by Alizarin red and Oil red staining. While, higher percentage of pulp derived cells were CD90 positive, the negligible percentage of CD45, which is a marker of hematopoietic cells, was estimated. Conclusion: Dental pulp derived cell are mesenchymal stem cells .

Document Downloads