title

کلونینگ و افزایش بیان موقت ژن NRF2 در سلولهای بنیادی مزانشیمی به واسطه سیستم بیانی آدنوویروسی بر مبنای فن آوری Gateway.

محمدزاده وردین, محمد and حبیبی رودکنار, مهریار (1392) کلونینگ و افزایش بیان موقت ژن NRF2 در سلولهای بنیادی مزانشیمی به واسطه سیستم بیانی آدنوویروسی بر مبنای فن آوری Gateway. مجله دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه ــ 17 (5). pp. 273-286. شاپا 9068-2251

[img]
Preview
Text
621kB

Official URL: http://journals.kums.ac.ir/ojs/index.php/jkums/art...

Persian Abstract

زمینه: افزایش بقاي سلول هاي بنیادي مزانشیمی پس از پیوند، کارایی این سلول ها را در درمان افزایش می دهد. به همین دلیل، جهت (NRF2) NF-E2 Related Factor- دست کاري سلول هاي بنیادي مزانشیمی با ژن هاي محافظت کننده سلولی همانند 2 در سلول هاي بنیادي NRF بهبود کارایی سلول درمانی مهم است. هدف این مطالعه، کلونینگ و افزایش بیان موقت ژن 2 مزانشیمی توسط سیستم بیانی آدنوویروسی می باشد. کلون pENTR/TOPO/D از سلول هاي بنیادي مزانشیمی جدا و توسط واکنش توپوکلونینگ، به وکتور NRF روش ها: ژن 2 به وکتور آدنوویروسی منتقل شد. جهت pENTR/TOPO/D از وکتور NRF ژن 2 ،Gateway گردید. سپس با استفاده از فناوري 293 منتقل گردید. در مرحله بعد، آدنوویروس هاي A تولید ذرات آدنوویروسی، وکتور آدنوویروسی نوترکیب به سلول هاي سلول هاي بنیادي مزانشیمی را آلوده کردند. ،NRF نوترکیب محتوي ژن 2 (DNA) Deoxyribonucleic acid با موفقیت جداسازي و کلون شد و صحت توالی آن توسط توالی یابی NRF یافته ها: ژن 2 مورد ارزیابی قرار گرفت. این افزایش بیان توسط سیستم بیانی آدنوویروس، موقت بود. NRF تأیید گردید. افزایش بیان 2 در سلول هاي بنیادي مزانشیمی توسط سیستم بیانی آدنوویروس به دلیل بیان موقت آن، یک NRF نتیجه گیري: افزایش بیان ژن 2 وسیله بسیار با ارزش می باشد. افزایش بیان دائمی ژن ها در سلول هاي بنیادي مزانشیمی مجاز نمی باشد.

Title

Cloning and transient over-expression of the NRF2 gene in mesenchymal stem cells using adenoviral expression system based on the Gateway technology

English Abstract

Background: Increased mesenchymal stem cells (MSCs) survival after transplantation can improve their therapeutic potential. Therefore, manipulation of the MSCs with cytoprotective genes such as NF-E2 Related Factor-2 (NRF2) is important to improve cell therapy efficiency. The aim of this study was cloning and transient over-expression of the NRF2 gene in MSCs by adenoviral expression system. Methods: NRF2 was isolated from MSCs and cloned into pENTR/TOPO/D vector by TOPO cloning reaction. NRF2 was translocated from pENTR/TOPO/D vector to adenoviral vector using the Gateway technology. The recombinant adenovirus vector was transformed into 293A cells to package recombinant adenovirus particles. Recombinant adenoviruses harboring NRF2 infected MSCs. Results: NRF2 was successfully isolated, cloned and its accuracy was confirmed by Deoxyribonucleic acid (DNA) sequencing. NRF2 over-expression was evaluated. This overexpression by adenoviral expression system was transient. Conclusion: NRF2 over-expression in MSCs with adenoviral expression system could be a valuable device because of its transient expression. Stable over-expression of genes in MSCs could not be permitted.

Item Type:Article
زبان سند : فارسی
نویسنده اول :محمد محمدزاده وردین
نویسنده مسئول :مهریار حبیبی رودکنار
Additional Information:Indexed in: DOAJ, SID, ISC, IranMedex, Magiran
Uncontrolled Keywords:سلول هاي بنیادي مزانشیمی، مهندسی ژنتیک، وکتورهاي ژنتیکی و وکتور کلونینگ ،NRF 2
کلیدواژه ها (انگلیسی):Mesenchymal Stem Cell, NRF2, genetic engineering, genetic vectors and cloning vector
Subjects:QS Human Anatomy
WH Hemic and Lymphatic System
Divisions:Faculty of Medicine > Department of Basic Sciences > Department of Anatomy
ID Code:7071
Deposited By: Dr Mohammad Mohammadzadeh
Deposited On:20 Nov 1394 06:44
Last Modified:18 Sep 1399 12:06

Repository Staff Only: item control page

Document Downloads

More statistics for this item...