title

ارتباط بین فعالیت تلومرازی و کینتیک رشد سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسان

حسین زاده انور, لیلا and حسینی اصل, سید سعید and سقا, محسن (1395) ارتباط بین فعالیت تلومرازی و کینتیک رشد سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسان. مجله دانشکده پزشکی علوم پزشکی تهران ــ 74 (5). pp. 321-329. شاپا 1764-1683

[img]
Preview
Text
1MB

Official URL: http://tumj.tums.ac.ir

Persian Abstract

زمينه و هدف: تلومراز با افزودن توالي تكراري به انتهاي3 کرومزوم نقش بسیار مهمی در حفظ طول تلومر دارد.از طرف ديگر، سلولهاي بنيادي مزانشيمي بند ناف انسانيhUC-MSCs قابليت تمايز به بيشتر رده هاي سلولي مانند سلولهاي عصبي و قلبي را داشته و دچار تغييرات بيولوژيكي در كشت طولاني مدت ميشوند. از اين رو انتخاب پاساژ سلولي مناسب ميتواند در بررسيهاي تكثير و تمايز سلولي بسيار مهم باشد. هدف از پژوهش كنوني بررسي ارتباط بين فعاليت آنزيم تلومراز در پاساژهاي مختلف كشت hUC-MSCs بود. روش بررسي: اين مطالعه تجربي از فروردين ١٣٩٣ تا آذر ١٣٩٣ در دانشگاه علوم پزشكي اردبيل بر روي نمونه هاي بندناف نوزادان تازه متولد شده در بيمارستان علوي اردبيل انجام شد. قطعات كوچكي از بندناف در محيط كشتDMEM حاوي 20% سرم جنين گاو كشت داده شدند. سپس، hUC-MSC حاصل از پاساژهاي يك تا سه براي بررسي زمان دو برابر شدن جمعيت سلولي(PDT) و استخراج پروتيين به روش CHAPS انتخاب شدند. در نهايت، فعاليت آنزيم تلومرازي آنها در پاساژهاي مختلف با استفاده از روشهاي qRT-TRAP assay و Telomeric repeat amplification protocol (TRAP) بررسي شد. يافته ها:PDT پاساژهاي يك تا سه به ترتيب 92/1±68/54، 71/1±03/55 و 54/2± 41/69 بود.میانگین فعالیت تلومرازی نیز به ترتیب 51/0± 58/30، 74/0±24/27 و 75/0±13/32برآورد شد كه افزايش معناداري را در پاساژ دوم نشان داد نتيجه گيري: با رسم منحني رشد، تعيين PDTو سنجش فعاليت تلومرازي سلولهاي بنيادي مزانشيمي بند ناف انساني مشخص شد كه كشت طولاني مدت ميتواند بر فرايند تكثير سلولي و فعاليت تلومرازي تاثير بگذارد.

Title

Relationship between the telomerase activity and the growth kinetics of the Human Umbilical cord Wharton’s Jelly-derived Mesenchymal Stem Cells

English Abstract

Background: Telomerase as an enzyme with reverse transcriptase activity has an essential role in telomere maintenance by adding a telomere repeat sequence to the 3' end of chromosome and is important for regulating of many processes in embryonic development including cell proliferation and differentiation. Human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) with a self-renewal capacity are cells that can differentiate into various germ layer derivatives including neural cells and cardiomyocytes, and undergo biological changes during long-term cultivation. Hence, the passage number in which the cells expanded seems to be very important for proliferating and differentiating. This study was aimed at investigating the relationship between the telomerase activity and the growth rate of (hUC-MSCs) at different passages. Methods: This experimental study was performed in Ardabil University of Medical Sciences, Iran, from March 2014 to December 2014. The umbilical cord samples were obtained from full-term neonate hospitalized in Alavi’s Hospital in Ardabil under sterile conditions. The umbilical vessels were clear off and the small pieces of the umbilical cord were cultured in Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM) supplemented with 20% fetal bovine serum (FBS). Then, the hUC-MSCs were harvested from passage one to three to calculate the population doubling time (PDT) and extract proteins by using CHAPS lysis buffer. Finally, the telomerase activity of the cells at different passages was measured by telomeric repeat amplification protocol (TRAP) and qRT-TRAP assays. Results: The hUC-MSCs population doubling time at passage from 1 to 3 were calculated as the average of 54.68±1.92, 55.03±1.71 and 69.41±2.54 hours, respectively, suggesting the higher cell passage number, the more extended PDT. The threshold cycles (CTs) for the telomerase activity also showed 30.58±0.51, 27.24±0.74 and 32.13±0.75 for the cell passage from one to three, respectively, representing the significant increasing in telomerase activity at passage two compared with the other passages (P= 0.021). Conclusion: Analysis of the growth curve, PDT determination and measurement of telomerase activity of the human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells showed that the long-term cell culture can affect on the cell proliferation and the telomerase activity.

Item Type:Article
زبان سند : فارسی
نویسنده اول :لیلا حسین زاده انور
نویسنده :سید سعید حسینی اصل
نویسنده مسئول :محسن سقا
Additional Information:Indexed in: SCOPUS, EMBASE, EBSCO, Cambridge Scientific Abstracts (CSA), CAB Abstracts (CABI), Chemical Abstract Service (CAS), DOAJ, Index Copernicus, IMEMR, SID, Magiran , ISC, ISC, Iran Medex, Google Scholar
Uncontrolled Keywords:منحنی رشد سلولی، فعالیت تلومرازی، سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از ژله وارتون بند ناف انسان
کلیدواژه ها (انگلیسی):Growth Rate Curve, Telomerase Activity, Human Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cells
Subjects:QS Human Anatomy
Divisions:Faculty of Medicine > Department of Basic Sciences > Department of Anatomy
ID Code:7879
Deposited By: Dr Mohsen Sagha
Deposited On:19 Jul 1395 08:27
Last Modified:19 Jul 1395 08:27

Repository Staff Only: item control page

Document Downloads

More statistics for this item...