بررسی اثر داروی ماینوکسیدیل روی بیان ژن های ناحیه ی بالب و بالج فولیکول موی موش سوری

Persian Abstract

ماینوکسیدیل رایج ترین دارو برای درمان آلوپسی آندروژنیک است . بررسی ها نشان داده است که این دارو باعث افزایش طول دوره ی رشد مو(آناژن)و تسریع در انتقال فولیکول مو از فاز کاتاژن به آناژن می شود. مطالعات در زمینه ی مکانیسم اثر ماینوکسیدیل نادر بوده و هنوز سلول های هدف و مسیرهای سیگنالینگی که ماینوکسیدیل به واسطه آن ها اثر خود را اعمال می کند به درسنی شناخته نشده است. ما در مطالعه ی حاضر بیان ژن های Akt1 ، Erk1 ، SHH ، BMP4 ، Kras1 و – βcatenin را با استفاده از روش PCR-time Real مورد بررسی و ارزیابی قرار دادیم. سلول های ناحیه ی بالب و بالج فولیکول مو را در کشت داده و با غلظت های مختلف ماینوکسیدیل و لیزات پالکتی انسان تیمار کرده، میزان بقای سلولی با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت.همچنین فولیکول های موی موش سوری جداسازی و به مدت هفت روز با ماینوکسیدیل 25µg و %20 HPL تیمار شدند. سپس میزان بیان ژن های Akt1 ، Erk1 ، SHH ، BMP4 ، Kras1 و catenin–β با استفاده از روش PCR-time Real مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج ما نشان داد که ژن های SHH ، Erk1 ، Kras1 و catenin–β در نتیجه ی تیمار با ماینوکسیدیل 21 میکروگرم و %20 HPL افزایش بیان قابل مالحظه ای نسبت به گروه کنترل داشتندو همچنین نتایج MTT و رنگ آمیزی آکریدین اورنج- اتیدیوم برماید نشان دادند که غلظت های باالی 122 میکروگرم ماینوکسیدیل باعث افزایش مرگ سلولی ونکروز سلول ها می شوند. یافته های این مطالعه نشان داد که ماینوکسیدیل با افزایش بیان ژن SHH باعث شتاب در شروع آناژن می شود.همچنین افزایش بیان ژن های Kras1 و Erk1 مؤید این مطلب است که ماینوکسیدیل از طریق مسیر سیگنالینگ Erk-Raf-Kras باعث افزایش تکثیر سلول ها و محافظت از آپوپتوز می شود.

Title

Minoxidil effects on anagen-related gene expression in bulge stem cells and bulb cells of the mouse hair follicles

English Abstract

It is believed that different signaling pathways to be expressed in the bulge and bulb regions of hair follicle during anagen. Hair follicle morphogenesis depends on Wnt, Shh, Notch, BMP and other signaling pathways. We hypothesized that the bulge and bulb cells express specific genes and possess distinctive behavior after exposure to minoxidil. Minoxidil effects on hair loss well-known and it induces telogen to anagen transition, however, the possible mechanism by which it acts are largely unexplored. In this study, we investigated whether minoxidil activate Kras, BMP4, Shh, and β-catenin in the bulge or bulb cells. Whisker follicles were isolated and bulge and bulb regions dissected under an invert microscope, and the cell viability evaluated using acridine orange/ ethidium bromide (AO/EB) and DAPi staining. Then, the bulge and bulb cells treated with 100 µg minoxidil, and reverse transcriptase (RT) and real time polymerase chain reaction (PCR) were performed to examine the expression of Kras/ERK1/Akt1, BMP4, Shh and β-catenin in the presence or absence of minoxidil. cultured bulge and bulb cell viability were observed by application of various concentration of minoxidil in mice. Minoxidil stimulated the cell survival. Kras/ ERK1, Shh and β-catenin genes expression were upregulated in response to minoxidil treatment. This new function for minoxidil does not require the vascularization of dermal papilla and therefore operates through a mechanism independent of its activity in dermal papilla cells. These data indicate that, in addition to its established role in β-catenin activation in the dermal papilla, minoxidil can promote proliferation of resting hair follicle stem cells (HFSCs) and bulb cells through different signaling pathway.

Document Downloads