title

اپرات اسید رتینوئیک تمام ترانس بر القا آپوپتوز و بیان ژنهای notch1 و hes1 در رده سلولی سرطان معدهMKN-45

نیاپور, نازیلا and شکری, سمیرا and امانی, مجتبی and شریفی پاسندی, مرضیه and صالحی, حسین and نیاپور, علی (1395) اپرات اسید رتینوئیک تمام ترانس بر القا آپوپتوز و بیان ژنهای notch1 و hes1 در رده سلولی سرطان معدهMKN-45. کومش ــ 17 (4). pp. 1024-1032. شاپا 1608-7046

[img]
Preview
Text
841kB

Official URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir

Persian Abstract

مقدمه: سرطان معده یکی از شایع ترین سرطان های جهان و دارای بالاترین میزان مرگ و میرهای مربوط به سرطان می باشد. رتینوئیک اسید و مشتقات آن به دلیل داشتن ویژگی های ضد تکثیری، آنتی اکسیدانی، پروآپوپتوتیک و اثر تمایزی به عنوان یک ماده شیمی درمانی و Chemopreventive بالقوه مورد استفاده قرار می گیرند. رتینوئیک اسید تمام ترانس (ATRA) به عنوان یک داروی تایید شده برای درمان بیماران مبتلا به لوسمی پرومیولوتیک حاد (APL) استفاده می شود. مسیر پیام رسانی سلولی notch نقش مهمی در حفظ تعادل میان تکثیر سلولی و آپوپتوز ایفا می کند. فعالیت نابجای این مسیر در توسعه و پیشرفت بسیاری از بدخیمی ها از جمله سرطان معده نقش دارد. در این تحقیق اثرات ATRA بر بقا سلول، تغییرات چرخه سلولی و همچنین آپوپتوز سلول های سرطانی معده رده سلولی MKN-45 بررسی شده و اثرات احتمالی آن بر بیان برخی از ژن های مسیر پیام رسان Notch مورد توجه قرار گرفته است. مواد و روش ها: در این مطالعه سلول های سرطانی معده رده MKN-45 با غلظت های مختلف (2.5، 5، 10، 15، 20، 25 میکرومولار) از رتینوئیک اسید تمام ترانس تیمار شدند و بقا سلولی با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت. اثر آپوپتوتیک ATRA از طریق سنجش میزان فعالیت آنزیم های کاسپاز 3 و 7 مورد بررسی قرار گرفت. به کمک تکنیک فلوسیتومتری و با استفاده از رنگ آمیزی DAPI روند تغییرات چرخه سلولی بررسی شد. در نهایت، پروفایل بیان ژن های hes1 و notch1 در گروه تیمار با ATRA و کنترل بوسیله RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: یافته های MTT حاکی از کاهش میزان بقا سلول های سرطانی MKN-45 به دنبال تیمار با رتینوئیک اسید بود. بیشترین تاثیر ATRA در غلظت 10 میکرومولار مشاهده شد.تفاوت معنی داری بین غلظت های 15، 20 و 25 میکرومولار با غلظت 10 میکرومولار وجود ندارد . تیمار سلول های سرطانی با ATRA سبب افزایش معنی دار فعالیت کاسپاز 3 و 7 در این سلول ها شد. نتایج فلوسایتومتری نشان دهنده توقف معنی دار چرخه سلولی در مرحله G1 در گروه دریافت کننده ATRA بود. همچنین، نتایج RT-PCR نشان دادند که میزان بیان ژن notch1 کاهش معنی داری را در گروه تیمار با ATRA در مقایسه با گروه کنترل دارد. نتیجه گیری: طبق نتایج این مطالعه مشخص شد که ATRA اثر سمیت خود را از طریق کاهش میزان حیات سلولی و القای آپوپتوز در ردهMKN-45 اعمال می نماید. کاهش بیان ژن Notch1 و شیفت چرخه سلولی از G2M به مرحله G1 می تواند تاییدی بر اثرات ضد تکثیری ATRA دانست.

Title

Effects of all trans retinoic acid on apoptosis induction and notch1, hes1 genes expression in gastric cancer cell line MKN-45

English Abstract

Introduction: Gastric cancer is one of the most common and lethal malignancies in the world. All-trans retinoic acid (ATRA) has been widely used to treat cancers, most notably for the acute promyelocytic leukemia (APL)-as a differentiation inducer. Notch signaling plays important oles in cell proliferation and apoptosis. Aberrant activation of notch signaling pathway has been stated in different malignancies including gastric cancer. The aim of this study was to assess the possible effects of ATRA on cellular viability, cell cycle shift and apoptosis induction of gastric MKN-45 cell line. Moreover, alterations of notch1 and hes1 gene expression profiles after ATRA treatment have been considered. Materials and Methods: Human gastric carcinoma cells (MKN-45) were treated with increasing concentrations of ATRA (2.5, 5, 10, 15, 20, 25 μM). The viability of cells was determined with 3-(4, 5-dimethlthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Caspase-Glo 3/7 assay kit was applied to measure the apoptosis. Flow-cytometry was employed to distinguish cells in different phases of cell cycle. Expression profiles for the notch1 and hes1 genes were evaluated by reverse transcriptase PCR (RT-PCR). Results: MTT assay showed that ATRA could diminish MKN-45 cell line viability rate; the most effective dose was 10 μM. Concentrations higher than 10 μM of ATRA had no significant effect on reducing cancerous cell viability. Furthermore, ATRA treatment significantly amplified caspase3/7activation. Flow-cytometry analyses showed significant accumulation of cells in G1 phase of cell cycle in ATRA treated group in compare to control. Following treatment with ATRA, showed a significant reduction in notch1and hes1 genes profile expression. Conclusion: According to our findings, ATRA could exert its cytotoxic effects on gastric cancer MKN-45 cell line through reducing cellular viability and inducing apoptosis. Remaining at G1 phase of cell cycle and reducing notch1 and hes1 gene expressions suggest the antiproliferative activity of ATRA.

Item Type:Article
زبان سند : فارسی
نویسنده اول :نازیلا نیاپور
نویسنده :مجتبی امانی
نویسنده مسئول :علی نیاپور
Additional Information:Indexed in: Scopus , EMBASE, DOAJ, Index Copernicus, SID, Iranmedex, Emro, CABI (UK), Magiran, ISC
Uncontrolled Keywords:سرطان معده، اسید رتینوئیک تمام ترانس ، اپوپتوز ، هدایت سیگنال
کلیدواژه ها (انگلیسی):Stomach Neoplasm, ATRA, Apoptosis, Signal transduction, Receptors, Notch
Subjects:QU Biochemistry
Divisions:Faculty of Medicine > Department of Basic Sciences > Department of Biochemistry
ID Code:8498
Deposited By: Dr Mojtaba Amani
Deposited On:18 Nov 1395 11:14
Last Modified:18 Nov 1395 11:14

Repository Staff Only: item control page

Document Downloads

More statistics for this item...