ارتباط بین فعالیت تلومرازی و کینتیک رشد سلول های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بند ناف انسان

Persian Abstract

زمينه و هدف: تلومراز با افزودن توالي تكراري به انتهاي3 کرومزوم نقش بسیار مهمی در حفظ طول تلومر دارد.از طرف ديگر، سلولهاي بنيادي مزانشيمي بند ناف انسانيhUC-MSCs قابليت تمايز به بيشتر رده هاي سلولي مانند سلولهاي عصبي و قلبي را داشته و دچار تغييرات بيولوژيكي در كشت طولاني مدت ميشوند. از اين رو انتخاب پاساژ سلولي مناسب ميتواند در بررسيهاي تكثير و تمايز سلولي بسيار مهم باشد. هدف از پژوهش كنوني بررسي ارتباط بين فعاليت آنزيم تلومراز در پاساژهاي مختلف كشت hUC-MSCs بود. روش بررسي: اين مطالعه تجربي از فروردين ١٣٩٣ تا آذر ١٣٩٣ در دانشگاه علوم پزشكي اردبيل بر روي نمونه هاي بندناف نوزادان تازه متولد شده در بيمارستان علوي اردبيل انجام شد. قطعات كوچكي از بندناف در محيط كشتDMEM حاوي 20% سرم جنين گاو كشت داده شدند. سپس، hUC-MSC حاصل از پاساژهاي يك تا سه براي بررسي زمان دو برابر شدن جمعيت سلولي(PDT) و استخراج پروتيين به روش CHAPS انتخاب شدند. در نهايت، فعاليت آنزيم تلومرازي آنها در پاساژهاي مختلف با استفاده از روشهاي qRT-TRAP assay و Telomeric repeat amplification protocol (TRAP) بررسي شد. يافته ها:PDT پاساژهاي يك تا سه به ترتيب 92/1±68/54، 71/1±03/55 و 54/2± 41/69 بود.میانگین فعالیت تلومرازی نیز به ترتیب 51/0± 58/30، 74/0±24/27 و 75/0±13/32برآورد شد كه افزايش معناداري را در پاساژ دوم نشان داد نتيجه گيري: با رسم منحني رشد، تعيين PDTو سنجش فعاليت تلومرازي سلولهاي بنيادي مزانشيمي بند ناف انساني مشخص شد كه كشت طولاني مدت ميتواند بر فرايند تكثير سلولي و فعاليت تلومرازي تاثير بگذارد.