جداسازي سلولهاي بنیادي فولیکول مو CD34 مثبت با استفاده از سیستم جداسازي سلولی در میدان آهن ربایی

خلاصه فارسی

زمینه و هدف: سلولهاي بنیادي فولیکول مو چند توان هستند و چندین نوع سلول بنیادي در ناحیه بالج فولیکول مو شناسایی شده است. جداسازي دقیق سلولهاي بنیادي فولیکول مو با استفاده از مارکرهاي سطحی یکی از روشهاي مناسب جهت جایگزینی روشهاي جداسازي قدیمی محسوب میشود. در این مطالعه از روش جداسازي سلول در میدان آهنربایی براي جداسازي سلولهاي بنیادي فولیکول مو استفاده شده است. روش کار: در این مطالعه فولیکول موي سبیل موش سوري نژاد Balb/c در زیر میکروسکوپ معکوس تشریح شد و نواحی حاوي سلولهاي بنیادي فولیکول مو (بالج) جدا شد و نواحی بالج به مدت 14 روز کشت داده شدند. سلولهاي CD34 مثبت با روش جداسازي سلول در میدان آهنربایی و توسط آنتی بادي مونوکلونال CD34 متصل به میکروبید جداسازي شدند و در محیط کشت DMEM/F12 حاوي 10% سرم گاوي کشت داده شدند و تعداد سلولهاي CD34 با استفاده از لام نئوبار شمارش شدند و در زیر میکروسکوپ فلوروسنت سلولهاي CD34 مثبت مشاهده شدند. یافته ها: نتایج این مطالعه نشان داد که جداسازي سلولهاي بنیادي CD34 مثبت با روش مکس (MACS) موفقیتآمیز بوده و04 /1±12 درصد سلولهاي CD34 مثبت بودند و این سلولها بعد از یک هفته کشت در محیط کشت زنده ماندند. نتیجه گیري: یافته این مطالعه نشان داد که روش جداسازي سلولی در میدان آهنربایی باعث افزایش تراکم سلولهاي بنیادي فولیکول مو در محیط کشت میشود

عنوان انگليسی

Isolation of CD34 Positive Hair Follicle Stem Cells Using Magnetic Activating Cell Sorting (MACS) Method

خلاصه انگلیسی

Background & objectives: Hair follicle stem cells (HFSCs) are multipotent and various types of HFSCs were introduced. HFSCs separation using cell surface markers is one of the interesting strategies in the replacement of old methods. In this study, we used magnetic activating cell sorting (MACS) to separate HFSCs. Methods: In this study, HFSCs were isolated from Balb/c mice and dissected under an invert microscopy, and bulge area isolated and the bulge cells cultivated about 14 days. The CD34 positive cells isolated using CD34 monoclonal antibody and magnetic activated cell sorting system (MACS), then the cells incubated in DMEM/F12 and 10% FBS. The CD34 positive cells counted using a neubauer slide and evaluated under a fluorescent microscopy. Results: Here, we isolated CD34 positive cells using MACS and 12±1. 04% of HFSCs were CD34 positive and we found that, CD34 positive cells survived during 7 days cell culture in vitro. Conclusion: The results show that MACS is useful to increasing density gradient of cells in vitro. Keywords: Hair Follicle Stem Cells, Magnetic Activating Cell Sorting, CD34, Fluorescent Microscopy

Document Downloads