مقایسه روش های معمول باکتریولوژیک با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) در تشخيص سريع مننژيت سلي

خلاصه فارسی

زمينه و هدف: بيماری سل در كشورهاي در حال توسعه شيوع بالایي داشته و میزان مرگ ومیر ناشی از مننژیت سلی، قویا در ارتباط با تاخیر در تشخیص و درمان می باشد. واکنش زنجیره ای پلی مراز PCR (Polymerase Chain Reaction) به عنوان یک ابزار تشخیصی برای شناسایی بیماری سل استفاده شده است. حصول سریع نتایج و حساسیت بالاتر PCRدر مقایسه با روش های معمول باکتریولوژیک موجب شده که PCR روش مناسبی در تشخیص بیماری سل، بویژه در مننژیت سلی، در مواردیکه که تشخیص مشکل است و یا تشخیص سریع مورد نیاز است باشد. اگرچه، احتمال نتایج مثبت و منفی کاذب را باید مورد توجه قرار داد. هدف از انجام این مطالعه مقایسه روش PCR با روش های معمول باکتریولوژیک (کشت و رنگ آمیزی ذیل-نلسون) برای شناسایی مایکوباکتریوم توبرکولوزیس در نمونه های مایع مغزی نخاعی CSF (Cerebro Spinal Fluid) بیماران مشکوک به مننژیت سلی بوده است. روش کار: تعداد 25 بيمار كه از نظر باليني و بر اساس علایم كلينيكي و يافته هاي بيوشيميایي به عنوان مننژيت سلي تشخيص احتمالي داده شده بودند و 10 بيمار مشكوك به مننژيت ويرال و يا مننژيت ناشي ار ديگر باكتري ها غير از مايكوباكتريوم توبرکولوزیس در اين مطالعه مورد بررسي قرار گرفتند. بر روي نمونه هاي ارسالي بعد از انجام آزمايشات روتين باكتريولوژي (تهيه اسمير مستقيم و كشت)،DNA Extraction و سپس آزمايش PCR بصورت NESTED OLIGO انجام گرفت و نتايج بدست آمده با هر سه روش مورد مقايسه و ارزيابي قرار گرفت. يافته ها: از 25 نمونه جمع آوري شده، PCR در 9 مورد ( 36%) DNA مايكوباكتريوم توبرکولوزیس را در نمونه های CSF شناسایي نمود ( طي دوبار تكرار آزمايش روي نمونه با PCR )، در حاليكه كشت تنها در 2 مورد ( 8%) و لام مستقيم با رنگ آميزي ذيل نلسون در يك مورد ( 4%) مثبت بودند. در ضمن هيچيك از 10 نمونهCSF كه مشكوك به مننژيت هاي ويرال و يا مننژيت ناشي از ديگر باكتري ها بودند با روش PCR نتيجه مثبت نشان ندادند. نتيجه گيري: نتايج فوق نشان مي دهد كه روش PCR يك روش حساس و سريع در تشخيص مننژيت سلي است، بطوري كه زمان بدست آوردن نتايج را از چندين هفته با روش هاي روتين باكتريولوژيك به يك تا دو روز خصوصا در بيماران اسمير منفي كاهش مي دهد. اين امر در بيماري مننژيت سلي كه يك اورژانس پزشكي محسوب مي گردد و نياز به تشخيص سريع و شروع فوري درمان دارد بسيار حایز اهميت مي باشد.

عنوان انگليسی

Comparison of conventional bacteriology with polymerase chain reaction (PCR) technique for rapid diagnosis of tuberculous meningitis

خلاصه انگلیسی

Background & Objective: Tuberculosis is more prevalent in developing countries and death from tuberculosis meningitis is strongly associated with delays in diagnosis and treatment. Polymerase chain reaction (PCR) has been incorporated as a diagnostic tool for the diagnosis of tuberculosis. The rapid results and greater sensitivity compared to traditional microbiological methods makes PCR a suitable technique in tuberculosis, especially in tuberculosis meningitis, when diagnosis is difficult or when rapid diagnosis is needed. However, the possibility of false positive and false negative results must be considered. The aim of this study was to compare the conventional bacteriology (culture Ziehl- Neelsen staining) with polymerase chain reaction (PCR) technique for rapid diagnosis of tuberculosis meningitis. Methods: This study included 25 clinically diagnosed patients that were suspected to have tuberculosis meningitis and 10 other bacterial or viral meningitis patients were investigated. DNA was extracted from CSF and the NESTED PCR using specific primers were done. Results: In 25 samples, Mycobacterium tuberculosis DNA was detected in 9 (36%) by PCR, 2(8%) and 1(4%) with culture and direct smear was obtained, respectively. whereas no DNA bands were detected in patient with the other 10 meningitis. The entire procedure was repeated and the same result was obtained. Conclusion: The findings of this study indicated that PCR is a powerful method for rapid and sensitive diagnosis of tuberculosis meningitis. In a way that it decreases obtaining the results from several weeks in bacteriological methods to one to two days, especially in smear negative patients. This is very important in tuberculosis meningitis because it is a medical urgency and needs rapid diagnosis and early treatment.

Document Downloads